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pcr核酸检测原理
核酸检测的原理为聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR),这是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,这时候大家是不是又有疑问,前面不是说新冠病毒是RNA病毒吗?怎么复制DNA呢?其实在新冠检测过程中,并不能简单的复制病毒RNA。新冠病毒核酸检测实际采用的技术是逆转录-聚合酶链式反应 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR),即逆转录PCR,这种技术是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。
其主要过程为:先将新冠病毒的核酸(RNA)逆转录为对应的互补单链脱氧核糖核酸(cDNA);再以此为模板通过PCR进行DNA扩增,同时,使用标记有荧光的特异性探针对扩增得到的DNA进行标记并检测,如果存在新冠病毒核酸,原本样本中微量的病毒经过指数级扩增至巨大的数量,扩增仪就可检测到相应的荧光信号,并且,随着DNA的不断复制,荧光信号不断增强,就可以间接检测到了新冠病毒RNA的存在。
总的来说,新冠病毒核酸检测可总结为样本采集—RNA提取—RNA逆转录成cDNA--荧光定量PCR技术(病毒基因组检测)。
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