动物细胞组织培养及分类.pptx

细胞培养司徒镇强2003-4

细胞培养的优点

1.活细胞：

能长时间、直接观察、研究

活细胞的形态、结构、生命活动

2哪一种：类型：上皮？间质？--3性质：正常？肿瘤？--1可控制-选择对象：均一性、重复性6物理、化学、生物等因素5可控制-调节条件：各种因素4阶段：可控制：

可控制-利用方法：采用各种研究技术、记录方法：研究：倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记--记录：摄影照片、缩时电影、电视--

优点应用广：学科多：对象广：各种动物：低等动物--高等动物--人类一种动物：不同年龄--不同组织--正常或异常（肿瘤--）

较经济：

可提供大量、同时、重复性好的、01生物学性状相似的实验对象02

01现人工模拟体内环境的技术已经很高,02但,人工所模拟的条件与体内实际情况03仍不完全相同.04当细胞被置于体外培养后,05生活在缺乏动态平衡的环境中,06久了，必然发生变化.细胞培养的缺点

相对孤立、相对单一缺乏体内的系统作用、失去神经体液的调节和细胞相互间的影响与体内主要不同

2.主要表现失去原有组织结构和细胞形态

分化减弱或不显

细胞趋向单一化；3.提示要正确认识体外培养细胞

是一种特定条件下生长的细胞群体。

生长类型

01按生长方式:2型02粘附型细胞:附着在某一固相支持物表面才03能生长的细胞。04悬浮型细胞:不必附着于固相支持物表面，而05在悬浮状态下即可生长的细胞。06绝大多数有机体细胞属粘附型细胞，07只有少数细胞类型如某些肿瘤细胞和白细胞08可在悬浮状态下生长体外细胞培养物的生长类型

粘附:是大多数有机体细胞在体内1生存和生长发育的基本存在方式2含义两方面3结果基于粘附特性，使细胞与细胞之间相互结合形成组织，4有机体的绝大多数细胞必须5粘附于一固相表面6才能生存和生长。7贴附(粘附)型细胞

No.1培养时：这些细胞被放到体外环境中以后,同样需要粘附于某一固相表面才能生存和生长，因而No.2属于粘附型细胞。粘附(锚定或锚着)依赖型(性)细胞：唯有粘附于固相表面才能生存的细胞

类型01细胞在体内、外的粘附方式：存在差异02体内：粘附是全方位03外形具有复杂的立体特征04体外：多数情况，细胞只有一个附着平面05外形一般与体内时明显不同06按照培养细胞的主要形态，可分为几大类型07

分类1根据形态大致的不同，主要2类：2上皮样3成纤维细胞样4其它，不定型5

名称：仅形态上似体内，实际上不完全等于--来源：来源于外胚层，内胚层细胞如：皮肤及其衍生物消化道，乳腺，肺泡上皮性肿瘤形态：类似体内的上皮细胞扁平，不规则多角形，中有圆形核上皮样细胞型

易相连成片相靠—紧密相连—成薄层—铺石状生长时呈膜状移动很少脱离细胞群而单个活动生长特点

名称：凡在培养中形态与成纤维细胞类似的01来源：由中胚层间充质组织起源的组织02如：真正的成纤维细胞03心肌，平滑肌，成骨细胞，血管内皮04形态：似体内成纤维细胞的形态05胞体梭形或不规则三角形06胞质向外伸出2—3个长短不等的突起07中有卵圆形核08成纤维细胞样细胞

生长特点排列成放射状，漩涡状并不紧靠连成片，细胞—细胞接触易断开而

单独行动游离的单独的成纤维样细胞，

常有几个伸长的细胞突起

与体内同名的细胞不完全相同培养细胞的形态不稳定如：形态相似的成纤维细胞，可不同来源自同一动物不同组织的成纤维样细胞相似但

发展趋向不同条件改变，细胞形态可有变化贴附生长型--类型

培养细胞形态不稳定培养细胞形态不稳定

血清Hela高血清低血清

成纤维细胞样上皮样细胞

pHHela太酸或太碱标准pH

成纤维细胞样上皮样细胞

细胞密度3T3低密度高密度

成纤维细胞样上皮样细胞生长状态改变

悬浮或贴附悬浮贴附

圆形成纤维或上皮样

转化与否未转化转化后成纤维样可成上皮样

1培养时不贴附于底物而呈悬浮状态生长或以机械方法使保持