微生物课件实验1本科实验一细菌形态学.pptx
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医学微生物学实验一 细菌形态学 牛牛文库文档分享本次实验内容一、实验室规则二、细菌的基本形态和特殊 结构的观察三、革兰染色法四、油镜的使用 牛牛文库文档分享一、实 验 室 规 则 (一)实验前要做好实验预习,进实验室只带必要的文具、讲义,并穿工作服。 (二)实验室内应保持清洁、安静,实验时要认真严肃,禁止抽烟、饮食和开玩笑。 牛牛文库文档分享 (三)爱护实验器材,注意节约实验材料,实验室内任何物品不得带出室外。 (四)注意安全,若带菌材料污染桌面、地板、书籍和衣物或误吸入口,应立即报告教师进行处理。 牛牛文库文档分享 (五)实验中待培养的材料应放在培养区;实验用过的带菌材料如吸管、玻片等应放在消毒缸、消毒箱等消毒区,不得放在桌上或冲洗于水槽内。 牛牛文库文档分享 (六)实验完毕,桌面应整理清洁 ,洗手后方可离室。值日同学负责湿性打扫实验室,并关好水、电、门窗。 牛牛文库文档分享二、细菌基本形态的观察 细菌的基本形态可分为球菌、杆菌、螺形菌(包括弧菌)三类。 牛牛文库文档分享1.球菌: 如葡萄球菌经结晶紫染色后为球状,常堆集成葡萄串状,呈紫色。 牛牛文库文档分享金黄色葡萄球菌血涂片 牛牛文库文档分享葡 萄 球 菌 牛牛文库文档分享肺炎球菌 牛牛文库文档分享肺 炎 球 菌 牛牛文库文档分享链 球 菌 牛牛文库文档分享链 球 菌 牛牛文库文档分享2.杆菌: 如大肠杆菌经番红染色后呈淡红色杆状,两端钝圆,散在排列。 牛牛文库文档分享大 肠 杆 菌 牛牛文库文档分享 3.螺形菌: 如霍乱弧菌经稀释复红液染色后呈红色弧形,菌体微弯,如逗点状,或呈眉毛状,散在排列。幽门螺杆菌呈螺旋状、U状、S状及海鸥展翅状。 牛牛文库文档分享幽门螺杆菌 牛牛文库文档分享 三、细菌的特殊结构: 1、鞭毛 2、荚膜 3、芽胞 4、菌毛 牛牛文库文档分享鞭 毛Flagellum化学组成:鞭毛蛋白功能:运动器官与致病有关鉴定分类细菌 牛牛文库文档分享变形杆菌(鞭毛) 牛牛文库文档分享荚 膜Capsule化学组成:多糖或多肽功能:抗吞噬作用粘附作用抗有害物质损伤作用 牛牛文库文档分享芽 胞Spore功能与医学上意义:对外界的抵抗力增加可发芽成繁殖体有致病性有鉴别作用应以杀死芽胞为灭菌效果的指标 牛牛文库文档分享 四、革兰染色(一)细菌涂片的制作(二)染色: 单染色法 革兰染色法 抗酸染色法 复染色法 牛牛文库文档分享(一)细菌涂片标本的制作 1.涂片: 取清洁无油载玻片一张,将接种环用火焰烧红灭菌,待冷后取一环菌液轻轻涂抹在玻片上,制成直径约1cm大小薄层,然后将接种环灭菌。 牛牛文库文档分享2.干燥: 涂片置室温自然干燥,必要时可将标本面朝上,放在离火焰较高处微微烘干,但切勿在火焰上直烤。 牛牛文库文档分享3.固定: 标本面朝上,用钟摆样速度来回通过火焰三次。 牛牛文库文档分享(二)革兰染色法步骤 1.初染:在上述已固定的涂片 上,滴加结晶紫染液,染色1分钟,水洗。 2.媒染:滴加革兰碘液,作用1—3分钟,水洗。 牛牛文库文档分享 3.脱色:滴加 95%酒精,并频频摇动玻片,至无紫色脱出为止(约20秒),水洗。 4.复染:加番红染液,复染半分钟,水洗,用吸水纸印干后,油镜检查。 牛牛文库文档分享涂片-干燥-固定1 初染: 结晶紫染色液, 1分钟 媒染: 革兰碘液, 1分钟 脱色: 95%酒精, 15-20秒 复染: 番红染色液, 30秒 牛牛文库文档分享 牛牛文库文档分享(二)革兰染色法步骤(三)革兰染色法 1、结果观察: 革兰阳性菌---兰紫色 革兰阴性菌---红色 2、原理 3、意义 牛牛文库文档分享五、油镜的使用(一)油镜头的识别 显微镜的接物镜有低倍镜头,高倍镜头和油镜头,其中油镜头的放大倍数最大。 油镜头的下缘,标有油 100、oel、oil等字样。 牛牛文库文档分享(二)油镜的原理: 滴镜油后可以增加油镜视野的亮度。 牛牛文库文档分享(三)镜检要领 把载玻片固定于载物台上,使油镜头对准镜筒。于载玻片上滴一小滴液体石蜡,眼睛从镜筒侧面看,旋转粗调节器,使镜筒下降浸入镜油并贴近标本,但勿触及玻片。 牛牛文库文档分享(四)油镜的保护办法 镜检完毕后,把镜筒升高,用擦镜纸把油镜头上的镜油擦净。 牛牛文库文档分享作业:画图 1、混合细菌革兰染色结果。 (标题:实验一、细菌形态学 标注:细菌名称、染色法、放大倍数) 牛牛文库文档分享作业:画图 1、混合细菌革兰染色结果。 2、细菌特殊结构示教片之一。 (标题:实验一、细菌形态学 标注:细菌名称、染色法、放大倍数) 牛牛文库文档分享制片: 标记 涂片 干燥 固定革兰染色: 1 初染: 结晶紫染色液, 1分钟 2 媒染: 革兰碘液, 1分钟 3 脱色: 95%酒精, 15
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