微生物实验本科实验一细菌形态学.ppt

医学微生物学 实验一 细菌形态学  （一）实验前要做好实验预习，进实验室只带必要的文具、讲义，并穿工作服。 （二）实验室内应保持清洁、安静，实验时要认真严肃，禁止抽烟、饮食和开玩笑。 三、细菌的特殊结构： 1、鞭毛 2、荚膜 3、芽胞 4、菌毛 （三）革兰染色法 1、结果观察： 革兰阳性菌---兰紫色 革兰阴性菌---红色 2、原理 3、意义 五、油镜的使用 (一)油镜头的识别 显微镜的接物镜有低倍镜头，高倍镜头和油镜头，其中油镜头的放大倍数最大。 油镜头的下缘，标有油 100、oel、oil等字样。 (二）油镜的原理： 滴镜油后可以增加油镜视野的亮度。 （三）镜检要领 把载玻片固定于载物台上，使油镜头对准镜筒。于载玻片上滴一小滴液体石蜡，眼睛从镜筒侧面看，旋转粗调节器，使镜筒下降浸入镜油并贴近标本，但勿触及玻片。 镜检完毕后，把镜筒升高，用擦镜纸把油镜头上的镜油擦净。 （四）油镜的保护办法 作业：画图 1、混合细菌革兰染色结果。 （标题：实验一、细菌形态学 标注：细菌名称、染色法、放大倍数） 作业：画图 1、混合细菌革兰染色结果。 2、细菌特殊结构示教片之一。 （标题：实验一、细菌形态学 标注：细菌名称、染色法、放大倍数） * 本次实验内容 一、实验室规则 二、细菌的基本形态和特殊 结构的观察 三、革兰染色法 四、油镜的使用 一、实 验 室 规 则 （三）爱护实验器材，注意节约实验材料，实验室内任何物品不得带出室外。 （四）注意安全，若带菌材料污染桌面、地板、书籍和衣物或误吸入口，应立即报告教师进行处理。 （五）实验中待培养的材料应放在培养区；实验用过的带菌材料如吸管、玻片等应放在消毒缸、消毒箱等消毒区，不得放在桌上或冲洗于水槽内。 （六）实验完毕，桌面应整理清洁 ，洗手后方可离室。值日同学负责湿性打扫实验室，并关好水、电、门窗。 细菌的基本形态可分为球菌、杆菌、螺形菌（包括弧菌）三类。 二、细菌基本形态的观察 1．球菌： 如葡萄球菌经结晶紫染色后为球状，常堆集成葡萄串状，呈紫色。 金黄色葡萄球菌血涂片 葡 萄 球 菌 肺炎球菌 肺 炎 球 菌 链 球 菌 链 球 菌 2．杆菌： 如大肠杆菌经番红染色后呈淡红色杆状，两端钝圆，散在排列。 大 肠 杆 菌 3．螺形菌： 如霍乱弧菌经稀释复红液染色后呈红色弧形，菌体微弯，如逗点状，或呈眉毛状，散在排列。幽门螺杆菌呈螺旋状、U状、S状及海鸥展翅状。 幽门螺杆菌 鞭 毛 Flagellum 化学组成： 功能： 鞭毛蛋白 运动器官 与致病有关 鉴定分类细菌 变形杆菌（鞭毛） 荚 膜 化学组成： 功能： Capsule 多糖或多肽 抗吞噬作用 粘附作用 抗有害物质损伤作用 芽 胞 功能与医学上意义： Spore 对外界的抵抗力增加 可发芽成繁殖体有致病性 有鉴别作用 应以杀死芽胞为灭菌效果的指标 四、革兰染色 （一）细菌涂片的制作 （二）染色： 单染色法 革兰染色法 抗酸染色法 复染色法 （一）细菌涂片标本的制作 1．涂片： 取清洁无油载玻片一张，将接种环用火焰烧红灭菌，待冷后取一环菌液轻轻涂抹在玻片上，制成直径约1cm大小薄层，然后将接种环灭菌。 2．干燥： 涂片置室温自然干燥，必要时可将标本面朝上，放在离火焰较高处微微烘干，但切勿在火焰上直烤。 3．固定： 标本面朝上，用钟摆样速度来回通过火焰三次。 （二）革兰染色法步骤 1．初染：在上述已固定的涂片 上，滴加结晶紫染液，染色1分钟，水洗。 2．媒染：滴加革兰碘液，作用1—3分钟，水洗。 3．脱色：滴加 95％酒精，并频频摇动玻片，至无紫色脱出为止（约20秒），水洗。 4．复染：加番红染液，复染半分钟，水洗，用吸水纸印干后，油镜检查。 1 初染: 结晶紫染色液, 1分钟 媒染: 革兰碘液, 1分钟 脱色: 95%酒精, 15-20秒 复染: 番红染色液, 30秒 涂片-干燥-固定 （二）革兰染色法步骤 *