《动物细胞工程》.pptx

2.2动物细胞工程单克隆抗体等动物细胞工程常用的技术动物细胞培养动物细胞核移植动物细胞融合是其他动物细胞工程技术的基础。

为什么要进行动物细胞培养?动物细胞培养动物细胞培养和核移植技术1概念如何进行细胞培养?从动物机体中取出相关组织，将它们分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。

探究3、如何将动物组织分散成单个的细胞呢？2、动物细胞培养过程将组织分散成了单个细胞，这样做有什么好处？4、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？根据图2-10中细胞培养过程，回答下列问题：5、细胞膜的主要成份是什么？胰蛋白酶能将其破坏吗？由此可见，将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？1、动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动物的组织或器官，请解释原因？积极思考

讨论6.动物细胞培养的原理是什么？7.培养的细胞为何贴壁生长？8.原代培养与传代培养、细胞株与细胞系的区别？12.动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？11.动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组织培养基有何独特之处？9.传代培养的细胞都能一直传代下去吗？有些细胞为何能一直传代下去？10、人们在进行药物测试、基因表达等实验研究时，希望保存哪类细胞？为什么？

过程：动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液10代细胞50代细胞传代培养无限传代单个细胞加培养液原代培养用含胰蛋白酶的培养液剪碎细胞株细胞系遗传物质未改变遗传物质已改变动物细胞培养不能最终培养成生物体放入培养箱10%1%

1.2动物细胞培养过程胚胎或幼龄动物的组织器官细胞悬液10代细胞50细胞剪碎胰蛋白酶洗涤、稀释、分离原代培养用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4，此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。比老龄动物的组织细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛。分化程度越低，繁殖能力越强，越容易培养。动物细胞培养不能最终培养成生物体细胞增殖缓慢，核型可能变化动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。贴壁生长接触抑制10代以内，保持正常二倍体核型传代培养

动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液制成细胞悬浮液10代细胞部分细胞“癌变”，遗传物质改变，无限传代动物细胞培养不能最终培养成动物体50代细胞原代培养传代培养细胞贴壁剥离、分瓶细胞株细胞细胞系2、过程胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。动物细胞生长特性：

细胞贴壁过程细胞接触抑制

细胞接触抑制细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。

阅读书49页第三段，然后回答问题原代培养：

传代培养：从供体获取组织或细胞后的初次培养，一般把第1代细胞的培养与传10代以内的细胞培养统称为原代培养。将原代培养的细胞分离稀释后转入到新的培养基中继续培养，称为传代培养。一般是10代以后传到40、50代。

030201细胞株：传代培养的细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。细胞株和细胞系的区别：细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。有关概念

细胞悬浮液10代细胞50代细胞无限传代原代培养传代培养细胞株细胞系原代培养和传代培养、细胞株和细胞系多数组织细胞固定在表面生长和分裂。随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖

充足营养01多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的内环境的知识，思考以下问题：02体外培养细胞时需要提供哪些物质？03体外培养的细胞需要什么样的环境条件？适宜温度、PH和气体环境；无菌无毒环境04讨论

动物细胞培养条件：保证细胞顺利的生长增殖1、无菌、无毒的环境01（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）2、必须的营养物质02（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、核酸、嘌呤、嘧啶、激素、生长因子、动物血清等。）3、适宜的温度035+（-）0.5度4、充足的氧气和适宜的酸碱度04O2和CO2（95%空气和5%CO2）

动物细胞培养的条件（无菌处理和添加抗生素、更换培养液）与体内相同。合成培养基：糖、氨基酸、促生长因子（血清、血浆）、无机盐、