《毒理学》实验3小鼠骨髓细胞微核试验 .pptx
实验3小鼠骨髓细胞微核试验;2;3;4;5;实验步骤;1.试验动物及处理
;2.骨髓液的制备和涂片;3.固定:
将推好晾干的骨髓片放进染色缸中,甲醇固定15分钟,取出晾干。
4.染色(建成试剂盒Giemsa染液)
用染液一3滴,染色8min,再加染液二6滴,洗耳球混匀5min。细流水冲掉玻片染色液,晾干。;5.观察计数
先用低倍镜观察,选择分布均匀的区域,再在油镜下观察计数。
PCE细胞呈灰蓝色,正染红细胞(NCE)桔黄色。
细胞中的微核大半呈圆形,边缘光滑,嗜色性与核质一致,一个细胞内可以出现一个或多个微核。
计数1000个PCE中含微核的PCE数,并计算200个细胞中PCE/NCE的比值。;6.结果分析与评价;注意事项:
1.注意不要把股骨剪断
2.挤出骨髓处的肌肉要剔除干净
3.滴到玻片上的生理盐水不要太多,涂时要涂匀,
以便推片
4.染色前可以先看一下整体涂片情况,细胞分散度
是否良好
5.关键步骤是制作良好的骨髓涂片以及优良的染色;13