瘤胃液中挥发性脂肪酸的测定气相色谱法.pdf
T/NAIA0005—2020
ICS65.02
B40
团体标准
T/NAIA0005—2020
瘤胃液中挥发性脂肪酸的测定
气相色谱法
(征求意见稿)
2020-XX-XX发布2020-XX-XX实施
宁夏化学分析测试协会发布
T/NAIA0005—2020
瘤胃液中挥发性脂肪酸的测定
气相色谱法
1范围
本标准规定了测定瘤胃液中挥发性脂肪酸的气相色谱法。
本标准适用于瘤胃液中挥发性脂肪酸的测定。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过在本标准中的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,
其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标
准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新
版本适用于本标准。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T602化学试剂杂质测定用标准溶液的制备
3原理
利用挥发性脂肪酸易溶于水的特点,用偏磷酸除去可溶性蛋白质,直接进样,用外标法
定量测定挥发性脂肪酸的含量。
4试剂与材料
4.1偏磷酸。
4.2乙酸。
4.3丙酸。
4.4丁酸。
4.5戊酸。
4.6异戊酸。
4.725%偏磷酸:称取25g溶于100mL水中。
4.8标准储备液:称取乙酸(4.2)1250mg、丙酸(4.3)750mg、丁酸(4.4)500mg、戊酸
(4.5)500mg、异戊酸(4.6)500mg标准品(均为色谱纯或更高级别),用水定容至250mL,
浓度分别为5mg∕mL、3mg∕mL、2mg∕mL、2mg∕mL、2mg∕mL。置于4℃冰箱保存,有效期
为3个月。
5仪器和设备
5.1分析天平:感量0.0001g。
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5.2气相色谱仪:配有氢火焰离子化检测器(FID)。
5.3高速台式离心机。
5.4漩涡振荡器。
6瘤胃液的采集与保存
瘤胃液的采集在晨饲前进行,方法一般有两种,一种是通过瘤胃瘘管进行采集,另一种
是采用特定的胃管通过食道插入瘤胃进行采集。将采集好的瘤胃液用4层纱布过滤装入离心
管或其他相当的容器封口后放入液氮或-80℃冰箱保存。
7测定步骤
7.1试样制备与保存
取经4层纱布过滤后的瘤胃液1mL,置于2mL离心管中,加入25%的偏磷酸200uL,涡
旋混匀摇匀,10000r∕min离心10min,上清液经0.45um滤膜过滤装人进样小瓶待测。
7.2色谱条件
色谱柱:安捷伦DB-FFAP毛细管柱(30m×0.32mm×0.25um),或性能相当;
柱温:程序升温,初始温度60℃,以12.5℃/min速率升至190℃,保持1min;
进样口温度:220℃;
检测器温度:280℃;
载气为高纯氮气;
恒压:100KPa;
空气流量:400mL/min;
氢气流量:40mL/min;
尾吹气流量:25mL/min;
分流进样方式,分流比为30:1;
进样量:1ul。
7.3标准系列溶液
准确吸取混合储备液(4.8)0、2.5mL、5mL、10mL、20mL、40mL、50mL用水定容至100mL,
配制成相应的上机浓度(ug/mL)。
7.4测定