含噻吩片段的三嗪类化合物的合成与抗肿瘤活性研究.docx

背景介绍

脑胶质瘤是一种常见的颅内肿瘤，具有起病隐匿、病死率高的特点。脑胶质瘤年发病率高，属于临床罕见病。目前，胶质瘤的手段主要有手术切除，化学药物治疗和放射治疗。然而，很少有治疗方法能明显改善脑胶质瘤病人的预后。因此，迫切需要开发新型治疗脑胶质瘤的药物。

本文亮点

1从经典的FAK抑制剂TAE-226出发，通过分析TAE-226的晶体结构，采用基于结构的药物的设计方法，设计合成了22个化合物，并利用MTT法评估了它们对人脑星形胶质母细胞瘤细胞U87-MG?的抑制活性；

2本文所设计的含噻吩片段的三嗪类化合物未见文献报道，为抗脑胶质瘤药物研究提供了一类结构新颖的化合物。

内容介绍

1??实验部分

1.1??主要仪器与试剂

1.2??实验方法

人脑恶性星形胶质母细胞瘤细胞（U87-MG）购自中国典型培养物保藏中心，细胞均保存在RPMI1640或DMEM完全培养基中。化合物对U87-MG的体外抑制活性通过MTT法测定。

1.3?3-（（叔丁氧羰基）氨基）噻吩-2-羧酸甲酯（1）的合成

在100mL圆底烧瓶中，0℃条件下，将1.57g（10mmol）3-氨基噻吩-2-羧酸甲酯、0.6g（0.5mmol）4-二甲氨基吡啶（DMAP）在搅拌下溶于8mL二氯甲烷。将2.4g（11mmol）二碳酸二叔丁酯溶解在8mL二氯甲烷中后逐滴滴入混合液中。待反应原料加完后，升温至40℃反应3h后，加入1.9g（15mmol）N,N-二异丙基乙胺（DIEA）继续反应1h。待反应结束，对反应混合物进行减压浓缩，得到浅黄色液体。

2??结果与讨论

2.1?合成物结构研究

本文共合成新化合物22个，目标化合物(7a~7r)和化合物（8a~8d）的合成路线如图1所示。最初，3-氨基噻吩-2-羧酸甲酯与二碳酸二叔丁酯反应，得到产率为60%的化合物1。在NaOH溶液存在下，化合物1水解为羧酸得化合物2，产率为90%。随后，化合物2与甲胺盐酸盐反应得到95%产率的化合物3。在盐酸-乙酸乙酯溶液的帮助下，化合物3的Boc基团被脱保护，得到关键中间体4。

2.2?体外抗肿瘤活性研究

首先，我们通过MTT法评估了化合物7a~7r和8a~8d对人脑恶性星形胶质母细胞瘤细胞U87-MG的抗肿瘤增殖活性。如表1所示，对于U87-MG细胞系，大部分化合物对U87-MG细胞系的抑制率较差，少部分化合物如7l、7m和7n的抑制率分别为40.38%、40.66%和42.88%略低于TAE-226（45.77%），但化合物7h对U87-MG细胞的抑制作用最好，甚至比阳性对照TAE-226更有效，为53.90%。基于U87-MG肿瘤细胞试验的初步结果，我们获得了含噻吩片段的三嗪衍生物的初步构效关系。

最后，我们测试了活性最优化合物7h对肿瘤细胞的IC50值，以TAE-226为阳性对照，如图2所示。

3??结论

总之，我们合成了一系列新型的含噻吩片段的1,3,5-三嗪衍生物，并且评价了它们的体外抗肿瘤活性。其中，化合物7h在U87-MG肿瘤细胞测试中表现出比TAE-226更有效,IC50值为?9.528μmol/L。该设计为三嗪类衍生物的开发提供了一种新的选择，该设计为三嗪类衍生物的开发提供了一种新的选择，我们将对化合物7h进一步研究。