第三章蛋白质.ppt

第30页，共72页，星期日，2025年，2月5日4．等电点的计算中性氨基酸：以Gly为例K1=[Gly±][H+][Gly+]K2=[Gly-][H+][Gly±]pI时，[Gly+]=[Gly-][Gly±][H+]K1=[Gly±]K2[H+][H+]2=K1K2pH=（pK1+pK2）/2pI=（pK1+pK2）/2pI=（2.34+9.60）/2=5.97Gly第31页，共72页，星期日，2025年，2月5日酸性氨基酸，以Asp为例：第32页，共72页，星期日，2025年，2月5日碱性氨基酸，以Lys为例：先羧后氨先阿尔法第33页，共72页，星期日，2025年，2月5日（2）与甲醛的反应R—CH—COO-NH3+R—CH—COO-NH2+H+OH-中和滴定HCHOR—CH—COO-NHCH2OHHCHOR—CH—COO-N(CH2OH)2第34页，共72页，星期日，2025年，2月5日（3）与亚硝酸的反应第35页，共72页，星期日，2025年，2月5日（4）与茚三酮的反应此反应是氨基酸的特异性反应，常用于氨基酸的定性分析和定量分析。亚氨基酸(脯氨酸和羟脯氨酸)与茚三酮反应并不释放NH3，而直接生成黄色化合物。第36页，共72页，星期日，2025年，2月5日肽一个氨基酸的氨基与另一个氨基酸的羧基之间失水形成的酰胺键称为肽键，所形成的化合物称为肽。第37页，共72页，星期日，2025年，2月5日由两个氨基酸组成的肽称为二肽，三分子氨基酸缩合则形成三肽……由多个氨基酸组成的肽则称为多肽。少于10AA称为寡肽，多于10AA成为多肽或聚肽。分子量大于10000d称为蛋白质，小于10000d称为多肽。肽链中的氨基酸分子因为脱水缩合而基团不全，被称为氨基酸残基(residue)。（一）结构与命名第38页，共72页，星期日，2025年，2月5日在多肽链中，氨基酸残基按一定的顺序排列，这种排列顺序称为氨基酸顺序通常在多肽链的一端含有一个游离的?-氨基，称为氨基端或N-端；在另一端含有一个游离的?-羧基，称为羧基端或C-端。氨基酸的顺序是从N-端的氨基酸残基开始，以C-端氨基酸残基为终点的排列顺序。如上述五肽可表示为：Ser-Val-Tyr-Asp-Gln丝氨酰缬氨酰色氨酰天冬氨酰谷氨酸第39页，共72页，星期日，2025年，2月5日（二）多肽的性质1．多肽的水解多肽的肽键可以被酸、碱或酶水解。多肽被酸或碱水解时可发生完全水解，水解产物为各种氨基酸的混合物。被酶水解时多发生部分水解，水解产物为多肽片段。第40页，共72页，星期日，2025年，2月5日酸水解常用6mol/L的盐酸或4mol/L的硫酸在105-110℃条件下进行水解，反应时间约20小时。此法的优点是不容易引起水解产物的消旋化。缺点是色氨酸被沸酸完全破坏；第41页，共72页，星期日，2025年，2月5日碱水解一般用5mol/L氢氧化钠煮沸10-20小时。由于水解过程中许多氨基酸都受到不同程度的破坏，产率不高。部分的水解产物发生消旋化。该法的优点是色氨酸在水解中不受破坏。第42页，共72页，星期日，2025年，2月5日酶水解目前用于蛋白质肽链断裂的蛋白水解酶（proteolyticenzyme）或称蛋白酶（proteinase）已有十多种。应用酶水解多肽不会破坏氨基酸，也不会发生消旋化。水解的产物为较小的肽段。最常见的蛋白水解酶有以下几种：胰蛋白酶、糜蛋白酶。第43页，共72页，星期日，2025年，2月5日2．多肽链的消旋化是指某些旋光化合物在一定条件下转变为非旋光外消旋体的过程,消旋化通常是在某物的物理或化学因素(如加压、溶解、光、热)或某些试剂的作用下进行的。多肽链上的α碳原于均为L构型。在一定条件下，可转化为D构型。第44页，共72页，星期日，2025年，2月5日消旋外消旋内消旋物质中既有左旋手性分子，又有右旋手性分子，是两种分子的混合物，混合物整体表现叫外消旋化。是分子中既有左旋手性原子又有右旋手性原子，但分子整体没有旋光性，它是纯净物。第45页，共72页，星期日，2025年，2月5日3．颜色反应多肽可与多种化合物作用，产生不同的颜色反应，可用于多肽的定性分析和定量分析。（1）黄色反应：硝酸、氨基酸的苯基(酪氨酸和苯丙氨酸)（2）双缩脲反应：紫红色或蓝紫色络合物。定量测定多肽。1+碱性硫酸铜