《橙黄玉凤花组织培养育苗技术规程》.docx
Q/LB.□XXXXX-XXXX
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ICS
FORMTEXT65.020.20
CCS
FORMTEXTB61
FORMTEXT4413
FORMTEXT惠州市地方标准
DBFORMTEXT4413/TFORMTEXTXXXX—FORMTEXTXXXX
FORMTEXT?????
FORMTEXT橙黄玉凤花组织培养育苗技术规程
FORMTEXTCodeofpracticeontissuecultureofHabenariarhodocheila
FORMDROPDOWN
FORMTEXT?????
FORMDROPDOWN
FORMTEXTXXXX-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX发布
FORMTEXTXXXX-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX实施
FORMTEXT惠州市市场监督管理局??发布
STYLEREF标准文件_文件编号DB4413/TXXXX—XXXX
STYLEREF标准文件_文件编号DB4413/TXXXX—XXXX
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前言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。
本文件由惠州市林业局提出并归口。
本文件起草单位：惠州市林业科学研究所（惠州植物园管理服务中心）、惠州市林学会。
本文件主要起草人：刘德浩、钟小华、何沁园、吴颖、郑洲翔、黄丽纯、陈智涛、孟蕊、舒夏竺、巫添辉、江惠兰、卢永辉、李运龙、王少东、周小峰、刘健、张展鹏。
橙黄玉凤花组织培养育苗技术规程
范围
本文件规定了橙黄玉凤花（Habenariarhodocheila）组织培养育苗过程中外植体采集、外植体处理、瓶苗培育、瓶苗移植、病虫害防治、档案管理等技术要求。
本文件适用于橙黄玉凤花组培苗培育。
规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T6001育苗技术规程
LY/T1882林木组织培养育苗技术规程
LY/T2752林木轻基质无纺布容器育苗技术规程
术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
橙黄玉凤花Habenariarhodocheila?
橙黄玉凤花(Habenariarhodocheila)是兰科玉凤花属多年生草本植物，块茎长圆形，茎具叶；叶线状披针形或近长圆形，花茎无毛；花苞片卵状披针形，萼片和花瓣绿色，唇瓣红、橙红或橙黄色，花瓣直立，匙状线形；蒴果纺锤形，有喙；花期7月～8月，果期10月～11月。
外植体
4.1采集
需在连续3d晴天后采集成熟且未开裂的蒴果。
4.2消毒处理
用细毛刷清洁蒴果表面杂质，在超净工作台上用75%乙醇表面消毒20s～30s，无菌水冲洗1次～2次；然后用添加1滴～2滴吐温80的0.1%HgCl2溶液浸泡并不断摇动12min，用无菌水冲洗4次～6次，用灭菌过的滤纸吸干表面水分备用。
瓶苗培育
培养基
配制
种子萌发培养基为1/2MS＋NAA0.5mg/L＋AC0.2%，增殖培养基为1/2MS＋NAA0.4mg/L＋ZT3.0mg/L＋AC0.2%，生根培养基为1/2MS＋NAA0.2mg/L＋6-BA2.0mg/L＋AC0.2%，添加卡拉胶均为6g/L，蔗糖均为30g/L，pH值调至5.8～6.0。培养基配方参见附录A。
灭菌与存放
采用高压灭菌锅121℃持续20min灭菌后存放至超净工作台备用，按LY/T1882的规定执行。
培养条件
应定期清洁培养室，及时清除污染材料。培养室温度26℃±2℃，相对湿度65%～70%，光照强度1000lx～2000lx，日光照时长10h～12h。
种子萌发培养
用无菌解剖刀将消毒处理好的蒴果纵向切开,将其内部的细粉状种子均匀地撒播于培养基上；待培养20d～25d，种子开始出现膨大，形成白色的原球茎。
增殖分化培养
将未分化的原球茎转接至增殖培养基上，培养20d～25d，原球茎分化出叶原基后长出叶片，形成小苗；培养约35d，小苗基部生成丛生原球茎，进一步分化出丛生苗3株～10株。
生根培养
选取2片以上舒展叶片、高1cm～1.5cm的芽苗，接种在生根培养基中诱导生根，每株苗长出1条～3条新根和1个～2个椭圆形或长圆形块茎。单株苗继续增殖成丛生苗，部分用于继代增殖，部分用于炼苗种植。培养周期为30d～35d。
炼苗移植
基质与育苗袋
采用轻型基质（基质成分参照