DB23_T2514—2019_蓝靛果组培微插育苗技术规程_黑龙江省.docx
ICS65.020.01
B64
DB23
黑龙江省地方标准
DB23/T2514—2019
蓝靛果组培微插育苗技术规程
黑龙江省市场监督管理局
DB23/T2514—2019
前
言
本标准依据GB/T1.1-2009的编写规则起草。
本标准由黑龙江省市场监督管理局提出。
本标准起草单位:黑龙江伊蓝生物科技有限公司、伊春市九天生物科技有限公司、伊春市丰林县人
才驿站
本标准主要起草人:韦庆和、史福忠、于海鸥、马军、安晓莉、杨柳、刘桂森、郝文鹏、许广明、
李云哲、王春英、刘龙、张庆、马学文、刘佳。
I
DB23/T2514—2019
蓝靛果组培微插育苗技术规程
1范围
本标准规定了蓝靛果(Loniceracaerulea)组培微插育苗的术语和定义、培养基制备、外植体选
择与处理、诱导分化与继代增殖增壮、扦插、移植抚育和生产档案。
本标准适用于蓝靛果组培微插育苗。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T8321(所有部分)农药合理使用准则
NY/T496肥料合理使用准则通则
NY/T1276农药安全使用规范总则
LY/T1882林木组织培养育苗技术规程
3术语和定义
组培瓶苗经炼苗,去除培养基,截成1cm~2cm长的微小插穗,经激素处理,扦插在配制的培养基
上进行生根的苗木繁殖方法。
诱导分化培养基:MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.2mg/L+琼脂7.0g/L+蔗糖30g/L,pH值调至5.8;
继代增殖培养基:MS+6-BA2.0mg/L+IBA0.3mg/L+琼脂7.0g/L+蔗糖30g/L,pH值调至5.8;
增壮培养基:MS+6-BA0.3mg/L+IBA0.1mg/L+琼脂7.0g/L+蔗糖30g/L,pH值调至5.8。
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选择生长健壮、无病虫害的优良母株,春季新芽长至1cm~2cm时选用叶芽作外植体,休眠期可水
培芽作外植体,也可在新枝长至半木质化时剪取2cm~4cm嫩茎作外植体。
5.2外植体处理
外植体用洗涤剂作表面清洗,流水冲洗30min,放入消毒瓶中,消毒瓶用75%的酒精棉擦拭后放入
超净工作台,打开装有外植体的消毒瓶,倒入75%酒精并摇晃,浸泡消毒5s~10s,倒去酒精,用无
菌水冲洗外植体3次~4次;再用5%次氯酸钠加几滴吐温20或吐温80浸泡10min~12min,无菌水
冲洗4次~5次,无菌滤纸吸干外植体表面水分,两端各剪去2mm以上,保持茎段长度0.5cm~1.0cm,
接种至诱导分化培养基中。
6诱导分化与继代增殖增壮
6.1培养条件
培养室的温度控制在25℃±2℃,空气相对湿度控制在70%~80%,光照强度为27μmol?m-2?
s-1~36μmol?m-2?s-1,光照时间为12h/d~14h/d。
6.2诱导分化
将培养瓶的封口膜取下,培养瓶口倾斜在酒精灯外焰上旋转灼烧消毒。用枪式镊子在酒精灯上灼烧
消毒冷却后,将切割好的外植体放入不定芽分化诱导培养基中,每个培养瓶放2个~3个外植体,盖上封
口膜,标注日期。
外植体经诱导培养后,单株苗剪段,丛生芽分芽,转接至继代增殖培养基中培养。培养35d后再
重复进行继代增殖培养。
增殖继代培养中部分丛生芽弱,将其接种到增壮培养基中,培养3周后继续继代增殖培养或瓶外生
根扦插。
将瓶苗移到日光温室中,自然散射光下炼苗,温度控制在18℃~25℃,每天中午在培养瓶周围喷
洒雾水,封口炼苗1d~3d,松口炼苗1d~2d,开口炼苗2h~5h即可扦插。
在温室内作基质床,床宽110cm,作床高10cm,步道40cm。床面上铺5cm~7cm厚腐殖土,上面
将瓶苗取出,剪去培养基,截成1cm~2cm长的插穗,在生根液中速浸捞出,用镊子轻轻夹着插穗
按3cm×2.5cm的株行距划沟扦插到床面上,深度为插穗长度的1/2~1/3,不能倒插,插后浇透水,用
多菌灵800倍液喷施消毒。
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DB23/T2514—2019
7.4插后管理
扦插后搭设小拱棚覆膜加盖遮阳网,控制温度15℃~28℃、湿度在70%rh~90%rh、光照2500LX~
8000LX。适当通风、喷水,保持插穗叶面湿润。每7d喷一次杀菌剂,生根后结合杀菌消毒7d喷一次
0.1%磷酸二氢钾和硫酸铵肥,逐步撤除遮阳网和小拱棚,降低湿度到60%rh,增加光照。
8移植抚育
8.1
移植
当扦插苗长至8cm以上时可移植到室外培育大苗,春、秋两季均可移植。将扦插苗木按培养要求以
10cm~20cm×20cm~30cm株行距进行移植培育,移植后距地面5cm处剪去主茎。
8.2抚育管理
定期浇水、除草、松土,施肥按NY