DB23_T2544—2019_黑穗醋栗组织培养育苗技术规程_黑龙江省.docx

ICS65.020.20

B05

DB23

黑龙江省地方标准

DB23/T2544—2019

黑穗醋栗组织培养育苗技术规程

黑龙江省市场监督管理局

发布

DB23/T2544—2019

前??言

本标准依据GB/T1.1-2009的编写规则起草。

本标准由黑龙江省市场监督管理局提出。

本标准起草单位：黑龙江省农业科学院乡村振兴科技研究所。

本标准主要起草人：张鹍、宋德禄、李施扬、段亚东、宋鹏慧、刘海军、刘凤芝、秦栋、杨春梅、

梁文卫、杨光、周双、李鹏举、武新娟、杨大志、纪志贤。

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DB23/T2544—2019

黑穗醋栗组织培养育苗技术规程

1范围

本标准规定了黑穗醋栗（RibesnigrumL.）组织培养育苗技术的培养基的制备、消毒灭菌、材料

的选择与处理、初代培养、继代培养、生根培养、炼苗和移栽及生产档案。

本标准适用于黑穗醋栗组织培养育苗技术。

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规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T8321（所有部分）农药合理使用准则

NY/T1276农药安全使用规范总则

LY/T1882-2010

林木组织培养育苗技术规程

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培养基的制备

培养基配制按LY/T1882-2010中规定执行

灭菌后的培养基放入接种室，常温条件下7d内使用，2℃～4℃条件下14d内使用。培养基应

保存于洁净环境中，注意避光和防尘。

将采取的植条用饱和洗衣粉水漂洗10min，流水冲洗2h后置超净工作台上用75%的酒精消毒，无

菌水荡洗3次，每次3min，再用0.1%升汞消毒，无菌水荡洗5次，每次3min，最后用无菌滤纸吸干植

物材料表面的水分。

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DB23/T2544—2019

4.2培养基灭菌

瓶装培养基需在12h内完成灭菌，采用高压蒸汽灭菌锅灭菌，在压力1.1MPa、温度121℃条件

下灭菌20min。

4.3器具的消毒灭菌

剪子、镊子、烧杯等接种器具用高压灭菌锅在压力1.1MPa，温度121℃以下灭菌20min。

5材料的选择与处理

5.1

材料的选择

从生长健壮、无病虫害的母株上选取半木质化枝条、茎尖作为材料。

5.2接种

取下培养瓶的封口膜，将培养瓶口和镊子在酒精灯外焰上旋转灼烧消毒并冷却后，把茎段、茎尖切

割成0.5cm～0.8cm后接种到培养基中，每个培养瓶放3个～5个外植体，接种后盖上封口膜，并标

注日期。

6初代培养

6.1培养条件

培养室的温度控制在25℃±3℃，空气相对湿度70%～80%，光照强度1000Lx，光照周期6h/d。

6.2培养方法

外植体生长约30d左右，高5cm后，剪成1.0cm～1.2cm的小段接种到初代培养基中。

培养室的温度控制在25℃±3℃，空气相对湿度70%～80%，光照强度2000Lx～3000Lx，光照

周期6h/d。

在无菌操净工作台上，将初代培养30d左右生长健壮的小苗的顶芽或腋芽萌发形成的丛生芽，分割

成带单芽的茎段，接种于继代培养基中。每隔25d～30d将继代苗转接至相同培养基上继续培养。

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DB23/T2544—2019

待继代培养苗长至高度2cm～3cm时，接种于生根培养基中。

9炼苗和移栽

9.1

炼苗

生根20d左右、根系1.0cm～1.5cm时，及时移栽。移栽前2d～3d先松开瓶口1d后再打开瓶口,

置于温度25℃±3℃、通风、清洁的地方，不应阳光直射。

9.2移栽

9.2.1移植准备

选择温度、光照适宜，保温、保湿的温室或塑料棚内进行。选用50孔或70孔穴盘，基质为壤土、草

炭土和沙子混合，比例2：1：1。也可选用直径5cm、高5cm的蔬菜育苗钵或塑料营养钵，用500倍～800

倍敌克松溶液消毒，移栽前浇透水。

9.2.2移栽

将组培苗从瓶中取出，放入20℃左右的水中，将附在根上的培养基洗去，勿伤根系，根系过长的

要适当修剪。将清洗后的组培苗用镊子将其栽入准备好的穴盘或营养钵中，栽后及时浇透水。

9.3移栽后的管理

9.3.1水份

栽后2d～3d淋一次水，定植后10d～20d内湿度控制在80%～100%，当第一片新叶展开后，此

后湿度一直控制在70%左右。

应建立生产档案。包括：培养基的制备、消毒灭菌、材料的选择与处理、初代培养、继代培养、生

根培养、炼苗和移栽、病虫害防治等。

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