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DB23_T2874—2021_野生哺乳动物DNA检测样本采集技术规范_黑龙江省.docx

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ICS65.020.01

B05

DB23

黑龙江省地方标准

DB23/T2874—2021

野生哺乳动物DNA检测样本采集技术规范

黑龙江省市场监督管理局

发布

DB23/T2874—2021

本标准依据GB/T1.1-2009的编写规则起草。

本标准由黑龙江省林业和草原局提出。

本标准起草单位:黑龙江省濒危野生动物救护繁育中心、东北林业大学、黑龙江中央站黑嘴松鸡国

家级自然保护区服务中心、黑龙江挠力河国家级自然保护区管理局、黑龙江省林业和草原局野生动植物

保护处、黑龙江省林业规划设计院、黑龙江扎龙国家级自然保护区管理局、黑龙江乌裕尔河省级自然保

护区管护中心、黑龙江省自然与生态研究所院、海伦市林业和草原局、黑龙江省桦南县向阳林场。

本标准主要起草人:李天芳、杨飞飞、姜广顺、李显达、王振中、边梓希、姜东涛、汤伟权、曹洪

涛、潘丰、陶佳俐、陈福元、尹伟平、王芳、曲红焱、曲虹、刘赛思、曹婷、吕砚、徐卓、王广鑫、丰

田、魏丹、刘应竹、张士芳、王睿、崔振军。

I

DB23/T2874—2021

野生哺乳动物DNA检测样本采集技术规范

1范围

本标准规定了野生哺乳动物DNA检测样本采集的工具和材料、采集前的准备、采集方法、采样后动

物的后处理、样本记录、保存和运输、防疫注意事项、技术档案。

本标准适用于野生哺乳动物DNA检测样本采集。

2

规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

HJ628-2011生物遗传资源采集技术规范(试行)

LY/T1291活体动物运输要求

LY/T2359-2014陆生野生动物疫源疫病监测技术规范

SN/T2752.1-2011卫生检疫人员的自我防护规范

3工具和材料

3.1捕捉工具和设施

包括捕捉网、陷阱和麻醉枪(针)等。

3.2处理器材

包括剪刀(医用级或科学级)、解剖刀、镊子、带帽塑料试管(或离心管)、带帽广口瓶、滴管、封口

塑料袋、锡箔盒、乳胶手套等。

包括蒸馏水、液氮、干冰、冰盒、冰袋、(90%~100%)C2H5OH溶液、DNA缓冲液、血液抗凝剂等。

4.1捕捉和采集人员应进行专业培训,掌握捕捉技巧和采集技术等。

4.2应制定科学的采集方案。采样时应优先选择非损伤性取样,其次是非伤害性取样。非特殊需要,

不应进行伤害性取样。不应因采集活动破坏物种的种群和栖息环境。

5.1.1不直接接触动物,通过收集动物粪便、毛发等材料,进行DNA样本检测。

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DB23/T2874—2021

5.1.2采集时间和要点

a)采集动物粪便以冬季为主。应优先采集保留完好且新鲜的粪便,采集过程中应保持粪便表面粘

膜完好,应在同一粪堆中尽可能多的进行收集。每次采集时应使用一次性手套。

b)采集动物毛发不受季节限制。同一动物应沿着一个足迹链或者卧迹、剐蹭痕迹等收集毛发。

5.1.3样本临时保存

a)冬季采集动物粪便时,应将整块粪便装入封口袋。非冬季采集时,依据物种不同,将粪便尾部

切下或逐粒装入装有变色硅胶颗粒的离心管或封口塑料袋中密封,其余部分用信封保存。

b)收集到的动物毛发用蒸馏水冲去表面脏物后,放入离心管或封口塑料袋中保存。

5.2非伤害性取样

5.2.1通过捕获动物采集少量血液、小块组织等作为检测样本,不对其生理机能产生重大影响。

5.2.2捕捉对象应以青年个体和成熟个体为主,不捕获幼体和繁殖期、哺乳期的母体。

5.2.3捕捉和取样操作应快速、谨慎,尽量减轻野生动物的痛苦;应确保工作人员和野生动物的安全。

5.2.4活体运输按LY/T1291的规定执行。

5.2.5采集部位和重量

a)采集动物组织时,采集部位通常为动物的耳缘组织或趾。应减少对动物的伤害,采集量达到200mg

即可。

b)采血前用蒸馏水和酒精清洁采血部位。常用的采血部位为颈静脉、大隐静脉、头静脉和股静脉,

采血量应小于其体重的1%,通常50ul即可。

a)采集到的动物组织用蒸馏水清洗晾干后放入离心管中保存。离心管中应含有能没过样本的浓度

为(90%~100%)C2H5OH溶液或DNA缓冲液。

b)采集后的血液可置于加入了血液抗凝剂的带帽试管或离心管中保存。

5.3.1通过捕获野生动物采集其新鲜肌肉、器官等作为检测样本,对动物伤害较大甚至致死。

5.3.2伤害性取样对采集部位和采集量没有限制。

5.3.3样本临时保存见文本5.2.6。

采集到的样本应做好报备,样本信息记录按HJ628-2011中15的规定执行。

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DB23/T2874—2021

按SN/T2752.1中的规定执行。

10技术档案

应建立技术档案,内容包括:采集工具和材料、采集前的准备、采集方法、采样后动物的后处理、

样本记录、

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