DB51T 1175-2010 饲料中苯乙醇胺A的测定高效液相色谱法.docx
ICS
DB51
四川省地方标准
DB51/T1175—2010
饲料中苯乙醇胺A的测定高效液相色谱法
DeterminationofphenylethanolamineAinfeedsHigh-performanceliquidchromatography
2010-11-16发布2011-01-01实施四川省质量技术监督局发布
I
DB51/T1175—2010
目次
前言 II
1范围 1
2规范性引用文件 1
3定义 1
4原理 1
5试剂和材料 1
6仪器和设备 2
7试样制备 2
8操作方法 2
9结果计算 3
10重复性 4
附录A(资料性附录)色谱图 5
II
DB51/T1175—2010
前言
本标准的附录A为资料性附录。
本标准由四川省畜牧食品局提出并归口。本标准由四川省质量技术监督局批准。
本标准由四川省饲料工作总站负责起草。
本标准起草人：柏凡、李云、赵立军、张静、林顺全。
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DB51/T1175—2010
饲料中苯乙醇胺A的测定高效液相色谱法
1范围
本标准规定了饲料中苯乙醇胺A含量的高效液相色谱法检测方法。
本标准适用于配合饲料、预混合饲料和浓缩饲料中苯乙醇胺A的测定。方法最低定量限为2.0mg/kg。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682-2008,ISO3696:1987,MOD)
GB/T20195动物饲料试样的制备
3术语和定义
下列定义适用于本标准。
3.1
苯乙醇胺A2-(4-(nitrophenyl)butan-2-ylamino)-1-(4-methoxyphenyl)ethanol
苯乙醇胺A,俗称克伦巴胺，分子量：344.17分子式Ci?H??N?O?,2-[4-(4-硝基苯基)丁基-2-基氨基]-1-甲氧基苯乙醇，英文名称为2-(4-(nitrophenyl)butan-2-ylamino)-1-(4-methoxyphenyl)
ethanol。化学结构式如下：
4原理
样品中的苯乙醇胺A以盐酸甲醇溶液提取，提取液经固相萃取柱净化，用高效液相色谱法进行测定，外标法定量。
5试剂和材料
除方法另有规定外，试剂均为分析纯，实验室用水符合GB/T6682中一级水的规定。
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DB51/T1175—2010
5.1乙腈：色谱纯。
5.2甲醇：分析纯。
5.3甲酸：优级纯。
5.4苯乙醇胺A对照品：纯度≥95%。
5.5混合型阳离子固相萃取柱(60mg/3mL),或性能相当者。
5.60.1%甲酸溶液：取甲酸1.0mL加水定容至1000mL,摇匀，即得。
5.7盐酸-甲醇溶液：取0.1moL/L盐酸80mL,加入甲醇(5.2)20mL,摇匀，即得。
5.8稀释液：20%乙腈水溶液。
5.9氨化甲醇溶液：取氨水5mL,加入甲醇(5.2)至100mL,混匀。
5.10饱和醋酸铅溶液：在50mL水中加入一定量的醋酸铅，超声5min,直至固体不再溶解。
5.11标准储备溶液：100μg/mL,准确称取苯乙醇胺A,用甲醇配制成100μg/mL的标准贮备液，-18℃避光保存备用，有效期为三个月。
5.12标准工作溶液：根据需要，临用时用稀释液(5.8)稀释标准储备溶液(5.11),配制成浓度范围为1.0μg/mL～20μg/mL的标准工作溶液。
6仪器和设备
6.1实验室用样品粉碎机。
6.2电子天平：感量0.0001g、感量0.001g。
6.3离心机：可达5000r/min(相对离心力为2988g)。
6.4固相萃取装置。
6.5高效液相色谱仪：配紫外检测器。
6.6氮吹装置。
6.7有机滤膜：0.45μm。
6.8振荡器。
7试样制备
采样按照GB/T20195制备样品，全部通过0.28mm孔筛，混匀，装入密闭容器中，避光低温保存，