DB22_T1613-2012_饲料中三聚氰胺含量的测定液相色谱-质谱_质谱法_吉林省.docx
ICS65.120
B04
DB22
备案号：35744-2013
吉林省
地
方
标
准
DB22/T1613—2012
饲料中三聚氰胺含量的测定
液相色谱-质谱/质谱法
吉林省质量技术监督局
发布
DB22/T1613—2012
前
言
本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2001给出的规则起草。
本标准由吉林出入境检验检疫局提出并归口。
本标准起草单位：吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心、大成集团、嘉吉生化玉米工业有限公
司、白城出入境检验检疫局、珲春出入境检验检疫局。
本标准主要起草人：胡婷婷、姚天玲、王晓红、张丽、冯博、刘伟艳、张琦、李玲。
I
DB22/T1613—2012
饲料中三聚氰胺含量的测定液相色谱-质谱/质谱法
1范围
本标准规定了饲料中三聚氰胺的液相色谱-质谱/质谱测定方法。
本标准适用于饲料及饲料原料中三聚氰胺的测定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。
3原理
试样中残留的三聚氰胺用三氯乙酸溶液提取，经混合型阳离子交换固相萃取柱净化，用液相色谱-
质谱/质谱仪测定，外标法定量。
除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。
4.1三氯乙酸（C2HCl3O2）：优级纯。
4.2乙酸铵（CH3COONH4）：优级纯。
4.3乙酸铅（C4H6O4Pb.H2O）。
4.6氨水（NH4OH）。
4.7甲酸（CH2O2）：优级纯。
4.81%三氯乙酸溶液：准确称取10g三氯乙酸（4.1）于1L容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，混
匀后备用。
4.105%氨化甲醇溶液：准确量取5mL氨水（4.6）和95mL甲醇，混匀后备用。
4.110.1%甲酸的水溶液：准确吸取1mL甲酸（4.7），用水定容至1L，混合后备用。
4.1210mmol/L乙酸铵溶液：准确称取0.772g乙酸铵（4.2），用水溶解并定容至1L，混匀后备用。
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DB22/T1613—2012
4.13标准储备溶液：准确称取三聚氰胺标准物质（CAS号：108-78-1，含量≥99.0%）100mg（精确
到0.1mg），用甲醇溶解并定容于100mL棕色容量瓶中，配制成浓度为1000μg/mL的标准储备液。0
℃~4℃可避光保存6个月。
4.14标准工作液：准确移取一定体积的标准储备溶液（4.13），根据需要用基质液稀释成三聚氰胺浓
度为0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL和50.0μg/mL的系列标准工
作液。该溶液须配制于棕色容量瓶中，4-6℃条件下保存。
4.15混合型阳离子交换固相萃取柱（MCX固相萃取柱）：60mg/3mL。使用前依次用3mL甲醇、3
mL水活化。
4.16滤膜：0.22μm，有机系。
5仪器
5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配备电喷雾离子源（ESI）。
5.2组织捣碎机。
5.3高速离心机：10000r/min。
5.4氮吹仪。
称取5g（精确到0.01g）粉碎后的试样置于50mL离心管中，加人25mL三氯乙酸溶液（4.8），200μL
乙酸铅溶液（4.9），涡旋混合1min，超声提取10min后，10000r/min离心5min，取上清液2.5mL
做待净化液。
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DB22/T1613—2012
c)流速：0.3mL/min；
d)进样量：5μL。
6.4.2质谱参考条件
质谱参考条件如下：
a)电离方式：电喷雾电离（ESI）；
b)扫描方式：正离子扫描，多反应监测（MRM）；
c)电离电压：3kV～5kV；
d)离子源温度：300℃～550℃；
e)脱溶剂气：0.75MPa；
f)雾化气：1.5MPa；
g)辅助气：1.5MPa；
h)定性离子对、定量离子对、去簇电压、碰撞能量见表1。
表1三聚氰胺监测离子对、去簇电压和碰撞能量
母离子
子离子
m/z
去簇电压
碰撞能量
化合物名称
m/z
V
V
85*
55
55
27
40
三聚氰胺
127
68
注：加“*”的为定量离子。
在同一色谱/质谱条件下进行标准溶液和样品溶液的测定，如果样品溶液中检出的色谱峰的保留时
间与标准物质色谱峰的保留时间一致，所选择的两对子离子的质荷比也一致，而且