DB22_T1619-2012_牛尿中盐酸克伦特罗残留量的测定液相色谱-质谱_质谱法_吉林省.docx
ICS67.050
B04
DB22
备案号：35747-2013
吉
林
省地
方
标
准
DB22/T1619—2011
牛尿中盐酸克伦特罗残留量的测定
液相色谱-质谱/质谱法
吉林省质量技术监督局
发布
DB22/T1619—2012
前
言
本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2001给出的规则起草。
本标准由吉林出入境检验检疫局提出并归口。
本标准起草单位：吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心。
本标准主要起草人：马书民、张勋、赵庆松、杨璐、胡婷婷、康明芹、王明泰、荣会。
I
DB22/T1619—2012
牛尿中盐酸克伦特罗残留量的测定
液相色谱-质谱/质谱法
1范围
本标准规定了牛尿中盐酸克伦特罗残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法。
本标准适用于牛尿中盐酸克伦特罗残留量的测定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。
3原理
本方法采用高氯酸溶液沉淀蛋白，氢氧化钠溶液调节pH值后，用乙酸乙酯萃取，样液经浓缩后过
混合型阳离子交换固相萃取柱净化，液相色谱-质谱/质谱仪测定，外标法定量。
4.6高氯酸：含量为70%～72%。
4.90.1mol/L高氯酸溶液：0.83mL高氯酸溶解于100mL水中，混匀备用。
4.101mol/L氢氧化钠溶液：称取4gNaOH，溶于100mL水中，混匀备用。
4.110.1%甲酸溶液：准确吸取1mL甲酸（4.5），用水定容至1L，混匀后备用。
4.1250%甲醇溶液（50+50）：50mL甲醇（4.4）与50mL水混匀。
4.135%氨化甲醇（95+5）：95mL甲醇（4.4）与5mL氨水（4.7）混匀。
4.14标准储备溶液：准确称取适量的标准品，用甲醇(4.4)配制成100.0mg/L的标准贮备液，在0℃～
4℃冰箱中保存。
4.15标准工作溶液：根据需要用甲醇(4.4)稀释配制适当浓度的标准工作液，现用现配。
4.16有机相微孔滤膜：0.22μm。
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4.17混合型阳离子交换固相萃取柱（MCX固相萃取柱）：60mg/3mL。使用前依次用3mL甲醇、3mL
水活化。
5仪器与设备
5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配备电喷雾离子源（ESI）。
5.2氮吹仪。
5.3旋转蒸发器。
5.4天平：感量0.0001g和0.01g。
5.5涡旋混合器。
5.6离心机：转速大于7000r/min。
6分析步骤
6.1提取
取5mL样品（精确到0.1mL）于50mL离心管中，加入5mL高氯酸溶液（4.9）于涡旋混合器上
充分混合，用1mol/LNaOH溶液调节溶液的pH值至9.5±0.1，加入20mL乙酸乙酯，涡旋振荡混匀。4℃
条件下10000r/min离心5min，重复提取三次，合并乙酸乙酯相，放入浓缩瓶中，35℃旋至近干，用5mL
0.1%甲酸溶液(4.11)定容，待净化。
将上述样液过MCX柱净化，依次用5mL甲醇（4.4）、5mL水和5mL0.1%甲酸水溶液(4.11)对柱子
进行预处理，将样品溶解液以1.0mL/min的流速加载在MCX（4.17）小柱上，再依次用5mL0.1%甲酸溶
液、5mL水、5mL50%甲醇(4.12)洗柱，弃去淋洗液；真空抽干MCX柱2min，用5mL5%氨化甲醇（4.13）
进行洗脱，收集洗脱液。洗脱液在45℃下氮气流吹干，加入1mL乙腈：0.1%甲酸溶液（30:70）溶解残
渣，过0.22μm滤膜，进行HPLC-MS/MS测定分析。
除不称取试样外，均按6.1和6.2进行。
6.4测定
a)离子源：电喷雾离子源（ESI）；
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b)扫描方式：正离子扫描，检测方式：多反应监测（MRM）；
c)电离电压：3kV～5kV；
d)
离子源温度：300℃～550℃；
e)脱溶剂气：0.21MPa；
f)雾化气：0.31MPa；
g)辅助气：0.31MPa；
h)定性离子对、定量离子对、去簇电压、碰撞能量见表1。
表1盐酸克伦特罗选择监测离子(m/z)、碰撞气能量及去簇电压参数
碰撞气能量
（eV）
去簇电压
名称
定量离子对
定性离子对
(V)
411.2﹥203.0
411.2﹥259.0
25
25
盐酸克伦特罗277.0﹥203.0
50
6.