DB21_T3273-2020_猪伪狂犬病毒野毒株与gE基因缺失疫苗株TaqMan实时荧光定量PCR鉴别方法_辽宁省.docx
ICS11.220
DB21
B41
辽宁省地方标准
DB21/T3273—2020
猪伪狂犬病毒野毒株与gE基因缺失疫苗株
TaqMan实时荧光定量PCR鉴别方法
ATaqManReal-timePCRMethodforDifferentiationofWild-typeStrainfrom
gE-deletedVaccineStrainofPseudorabiesVirus
辽宁省市场监督管理局
发布
DB21/T3273—2020
目
次
前言................................................................................II
1
2
3
4
5
6
7
8
范围..............................................................................1
规范性引用文件....................................................................1
缩略语............................................................................1
仪器和耗材........................................................................1
试剂和材料........................................................................1
样品采集、处理和运输..............................................................2
荧光qPCR操作程序.................................................................3
结果判定..........................................................................4
附录A（规范性附录）溶液配制........................................................6
附录B（规范性附录）引物和探针......................................................7
I
DB21/T3273—2020
前
言
本标准根据GB/T1.1-2009的有关规定进行制定。
本标准由辽宁省农业农村厅提出并归口管理。
本标准负责起草单位：辽宁省农业发展服务中心。
本标准起草人：兰德松、顾贵波、周维、杨洺扬、李可心、孙世宇、张健、刘贺、李旭、高原、丁
静。
本标准发布实施后，任何单位和个人如有问题和意见建议，均可以通过来电和来函等方式进行反馈，
我们将及时答复并认真处理，根据实际情况依法进行评估及复审。
归口管理部门通讯地址：辽宁省农业农村厅（沈阳市和平区太原北街2号），联系电话：024标准起草单位通讯地址：辽宁省农业发展服务中心（沈阳市皇姑区宁山东路29号），联系电话：
024II
DB21/T3273—2020
猪伪狂犬病毒野毒株与gE基因缺失疫苗株TaqMan实时荧光定量
PCR鉴别方法
1
范围
本标准规定了猪伪狂犬病毒（pseudorabiesvirus,PRV）野毒株及gE基因缺失毒株的TaqMan荧光PCR
检测方法。
本标准适用于猪血液、组织脏器、精液、鼻腔拭子和细胞培养物等材料中PRV核酸的检测以及PRV
野毒株与gE基因缺失疫苗株病毒核酸的鉴别检测。
本标准的实验操作应在生物安全II级实验室（BSL-2实验室）中进行。
2
规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T6682
NY/T541
分析实验室用水规格和试验方法
兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范
糖蛋白D（glycoproteinD）
gE
糖蛋白E（glycoproteinE）
伪狂犬病病毒（pseudorabiesvirus）
荧光PCR仪、高速冷冻离心机（可控温至4℃，离心速度可达12000r/min以上）、组织研磨仪
或研钵、自动化核酸提取仪