DB12_T1148-2022_绵羊胚胎移植技术规程_天津市.docx
ICS65.020.30
CCSB43
12
天津市地方标准
DB12/T1148—2022
绵羊胚胎移植技术规程
Technicalregulationsforembryotransferofmeatsheep
天津市市场监督管理委员会
发布
DB12/T1148—2022
前
言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
本文件由天津市农业农村委提出并归口。
本文件起草单位:天津市农业科学院。
本文件主要起草人:张金龙、张效生、郭晓飞、葛慎锋、李义海、冯婧、姚大为、李玉鹏、董春晓、
王彪、陈龙宾。
I
DB12/T1148—2022
绵羊胚胎移植技术规程
1
范围
本文件规定了绵羊胚胎移植技术中实验室准备、供体羊冲胚、检胚及胚胎质量鉴定、受体羊胚胎移
植等技术要求。
本文件适用于绵羊胚胎移植。
2
规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件。
NY/T816
肉羊饲养标准
DB12/T137
肉用绵羊饲养管理技术规范
3
术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
将一头母畜(供体)的受精卵取出,移植到另一头母畜(受体)体内,使之继续发育至分娩产仔。
4
4.1
4.2
4.3
2
DB12/T1148—2022
4.3.3
室内环境温度保持在20℃~25℃,避免阳光直射。
5
供体羊冲胚
5.1
供体羊选择
5.1.1
5.1.2
供体羊谱系清楚、遗传稳定,品种优良、生产性能好;
体质健壮,年龄在1岁~4岁;
5.2
供体羊饲养管理
保持稳定的饲养环境,避免应激,饲养符合DB12/T137、NY/T816规定。
5.3
5.4
5.5
5.6
同期发情
在母羊发情周期的任意一天放置孕酮栓,具体参见附录D。
超数排卵
母羊放置孕酮栓后第10天开始注射促卵泡素(FSH),2次/天,连续4天,具体见附录D。
发情鉴定
取出阴道栓后每隔8小时用公羊试情1次,以母羊站立接受公羊爬跨为母羊发情标准。
人工授精
5.7
供体羊在手术前12小时空腹、禁水。
乳房前,腹部备皮,范围20cm×20cm。备皮后用5%碘酊棉球消毒,再用75%酒精棉球脱碘。
供体羊仰卧保定于手术床上,肌肉注射麻醉,麻醉后,使手术床与地面成45℃。
在乳房前2cm~3cm,腹中线侧面做5cm的纵向切口,依次切开皮肤、肌肉和腹膜。
从切口处取出子宫角,记录卵巢黄体的数量。
在子宫角大弯处用止血钳尖扎孔,将冲胚管插入,用注射器充气使冲卵管的气囊封闭一侧子
宫角,冲卵管的另一端接90㎜平皿。
冲卵针从子宫角末端向子宫角大弯方向刺入,使冲卵针、子宫角和冲卵管形成通路。
用注射器吸30ml冲胚液注入冲卵针冲洗子宫角,将液体经过冲卵管回收至90㎜培养皿中。
3
DB12/T1148—2022
5.7.5
创口缝合
5.7.5.1
5.7.5.2
5.7.5.3
冲胚完成后,将子宫送回腹腔。
缝合创口,肌肉腹膜连续缝合、皮肤结节缝合,皮肤前创口撒消炎粉。
缝合完成后进行创面整理,碘酊消毒,注射抗生素和解麻药物,解除保定。
6
检胚及胚胎质量鉴定
6.1
检胚
6.1.1
6.1.2
6.1.3
在35mm的培养皿中注入胚胎保存液,放在恒温台上预热。
将收集到的冲胚液移至实体显微镜下,检出胚胎,移入35mm的培养皿中。
每个平皿在显微镜下重复检查3次,检出平皿中所有胚胎。
6.2
胚胎质量鉴定
6.2.1
6.2.2
胚胎发育阶段和质量鉴定,参见附录E。
鉴定后的胚胎做好记录,包括羊号、胚胎发育阶段、质量等信息,见附录F。
6.3
胚胎装管
6.3.1
6.3.2
在体视显微镜下,将鉴定后的胚胎装入胚胎移植枪中,准备移植。
胚胎装入移植枪按照三段液滴两段空气,胚胎液滴位于移植枪的中间段。
7
7.1
受体羊组群加强饲养管理,保持环境相对稳定,避免应激,饲养符合DB12/T137、NY/T816规定。
手术法:参考供体羊手术5.7.2,取出子宫和卵巢,观察黄体数量和颜色,进行记录;
腹腔内窥镜法:在受体羊乳房前2cm~3cm腹中线两侧做各做一个创口,通过腹腔内窥镜观察
黄体数量、大小和颜色,并取出有黄体测的子宫角,进行记录。
在子宫角细段扎孔,将装有胚胎的移植枪通过该孔导入子宫角,推出胚胎,将子宫角送回腹腔
4
DB12/T1148—2022
移植胚胎后的受体羊,避免应激反应,饲养管理符合DB12/T137、NY/T816规定。
7.4.7
5
DB12/T1148—2022
附录A
(资料性)