2018届高考生物高考复习指导大二轮专题复习课件：专项能力提升四　三轮基础回扣(共157张PPT).ppt

考点细化：①平板冷凝后，要是有水滴滴到培养基上，会导致菌蔓延，这样就不能计数，分离了。为防止冷凝水滴到培养基上，所以培养时平板一定要倒置。 ②接种操作每次划线之前都要灼烧接种环，是因为每次操作都要及时灭菌，以防污染杂菌。操作结束时，仍然需要灼烧接种环的原因是防止杂菌污染环境。 2. 特定微生物的数量的测定 (7)测定微生物数量的方法有显微镜直接计数、统计菌落数目。 3. 培养基对微生物的选择作用 (8)在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。例如：在选择培养基的配方中，将尿素作为培养基中唯一的氮源，原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长。 考点细化：①选择培养基配置的原理是增加或减去某种成分，使要选择的微生物能生长，其它微生物不能生长。 ②培养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌 ③培养基中不加氮源可以分离出固氮微生物 四、血红蛋白的提取和分离 1．实验原理：利用蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力，分离不同种类的蛋白质。 2．凝胶色谱法原理：根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。相对分子质量小的分子要穿过多孔凝胶颗粒的内部通道，路程长，流动慢；相对分子质量大的分子直接通过凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快。 一、基因工程 1．基因工程的诞生 (1)基因工程：按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外 DNA 重组和转基因等技术，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 (2)基因工程诞生的理论基础是在生物化学、分子生物学和微生物学科的基础上发展起来，技术支持有基因转移载体的发现、工具酶的发现，DNA 合成和测序仪技术的发明等。 第十单元　现代生物科技 2．基因工程的原理及技术 (3)基因工程操作中用到了限制酶、DNA 连接酶、运载体 考点细化限制酶：限制酶主要从原核生物生物中分离纯化出来，这种酶在原核生物中的作用是识别 DNA 分子的特定核苷酸序列，并且使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 ①限制酶的特性是识别特定核苷酸序列，切割特定切点。限制酶产生的末端有两种黏性末端和平末端。 ②DNA 连接酶与 DNA 聚合酶的作用部位是磷酸二酯键，二者在作用上的区别为前者是恢复被限制性内切酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，后者单个的核苷酸连接到DNA分子上。 ③作为基因工程的载体应该具备标记基因、多个限制性内切酶切点、能够在宿主细胞内复制和稳定存等特点。 ⑤常见的载体种类有质粒、动植物病毒、入噬菌体的衍生物 (4)基因工程四步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达。 考点细化：① 目的基因的获取方法为根据基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在载体上的位置、基因的转录产物、以及基因的表达产物蛋白质等特性来获取目的基因。 ②基因文库、基因组文库、cDNA 文库的区别：含有某种生物不同基因的许多DNA 片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌体分别含有这种生物的不同基因，称之为基因文库。如果含有一种生物所有基因，叫做基因组文库。只包含一种生物的一部分基因，这种基因文库叫做部分基因文库，如cDNA 文库。 ③ 基因工程操作中构建基因表达载体的目的是将目的基因在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代，同时目的基因能够表达和发挥作用。 ④一个完整的基因表达载体包括：目的基因、启动子、终止子、标记基因。 ⑤将目的基因导入植物细胞、动物细胞和微生物细胞的常用方法分别是农杆菌转化法、显微注射法、Ca2＋处理法。 ⑥基因工程的受体细胞选择，植物可以采用体细胞，动物不能用体细胞，一般采用受精卵细胞。因为受精卵具有全能性。 ⑦当受体细胞是大肠杆菌时常用Ca2＋处理细胞，这样做的目的是使细胞处于一种能够吸收周围环境中的DNA 分子的感受态细胞。 ⑧目的基因的检测：转基因生物的DNA是否插入了目的基因(DNA分子杂交技术)；目的基因是否转录出了mRNA(分子杂交技术)；目的基因是否翻译成蛋白质(抗原－抗体杂交)；个体生物学水平鉴定。 ⑨目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因的检测和表达一般需要碱基互补配对。将目的基因导入受体细胞不需要碱基互补配对 3．多聚酶链式反应扩增DNA片段 (5)PCR：多聚酶链式反应的简称，是一种体外迅速扩增 DNA 片段的技术，它能以极少量的 DNA 为模板，在几小时内复制出上百万份的 DNA 拷贝。 (6)扩增方向：总是从子链的 5′端向 3′端延伸。 (7)需要引物的原因：DNA 聚合酶不能从头合成 DNA，而只能从引物 3′端延伸 DNA 链，因此 DNA 复制需要引物。 (8)原理：热变性原理， (9)条件：DNA 模板，