药用植物次生代谢相关酶基因克隆方法综述_战晴晴.pdf

·综 述· 药用植物次生代谢相关酶基因克隆方法综述 1,2 2 1* 2 战晴晴 ，隋春 ，张杰 ，魏建和 (1.东北林业大学生命科学院，哈尔滨 150040；2.中国医学科学院北京协和医学院药用植物研 究所，北京 100193) 摘要：目的 综述药用植物次生代谢酶基因克隆可采用的方法策略，为其基因克隆提供参考。方法 查阅相关文献进行总 结和归纳。结果 阐述了用于克隆药用植物次生代谢酶基因的功能克隆方法、表型克隆方法(DD-PCR、cDNA–AFLP、SSH)、 转座子标签克隆方法及图位克隆方法。结论 适用于药用植物次生代谢相关酶基因克隆的技术方法有很多种，研究者可根 据研究基础、目的和实验条件等进行选择。 关键词：药用植物；次生代谢；基因克隆 中图分类号：Q78 文献标志码：A 文章编号：1007-7693(2009)10-0805-05 Review on Gene Cloning Methods Involved in Medicinal Plant Secondary Metabolism ZHAN Qingqing1,2, SUI Chun2, ZHANG Jie1*, WEI Jianhe2(1. College of Life Sciences, Northeast Forestry University, Herbin 150040, China; 2. Institute of Medicinal Plant Development, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Beijing 100193, China) ABSTRACT: OBJECTIVE Reviewing gene cloning methods and strategies that can be used in medicinal plant secondary metabolism, to provide selection references. METHODS Searching and summarizing literatures on gene cloning of plants, especially of medicinal plants. RESULTS Gene cloning methods used in medicinal plant secondary metabolism, such as functional cloning method, phenotype cloning methods, transposon tagging and map-based cloning method were elaborated. CONCLUSION There are many methods used to clone genes in medicinal plant secondary metabolism, researchers should choose the suitable one with different basis, purposes and experiment condition. KEY WORDS: medicinal plants; secondary metabolism; gene cloning 次生代谢是存在于植物、动物和微生物中有别 线[1]。克隆相关酶基因是药用植物次生代谢研究的 于初生代谢的一类特殊而又复杂的代谢类型。通常 重要内容。 认为次生代谢是生物通过渐变或突变获得的一种 分子生物学发展至今，用于植物基因克隆的方 适应生存的方式；是生物体在长期进化中对生态环 法有很多种。主要可分为三类： 境适应的结果。植物次生代谢物不仅为人类提供了 一种类型是功能克隆，即根据已知基因产物 丰富的药物，香料及工业原料，而且一些次生代谢 推断出其相应核苷酸序列，再