食品中四环素类残留的酶联免疫检测试剂盒的研制.pdf

※技术应用 食品科学 2011, Vol. 32, No. 02 333 食品中四环素类残留的酶联免疫检测 试剂盒的研制 1 2 1 1 1 , 2 国占宝 ，武玉香 ，田文礼 ，赵亚周 ，彭文君 * ，柳家鹏 ( 1.中国农业科学院蜜蜂研究所，农业部授粉昆虫生物学重点开放实验室，国家蜂产品加工技术研发分中心，北京 100093 ；2 .北京华安麦科生物技术有限公司，北京 102200) 摘 要：目的：基于定量检测动物源性食品中四环素类抗生素的残留量，开发研制四环素类抗生素竞争酶联免疫 (ELI SA)检测试剂盒。方法：采用杂交瘤技术，筛选并克隆稳定分泌抗四环素(CEL) 的杂交瘤细胞株，利用免疫 BALB/c 小白鼠制备抗四环素单克隆抗体。结果：logit/log 拟合标准曲线为y = －2 .3x ＋2 .79 ，相关系数r=0.997 1， 线性检测范围为0.05～4.05ng/mL ，半数抑制剂量(IC50)为0.293ng/mL ，灵敏度为0.05ng/mL ，检测限为3～5ng/mL； 组织、牛奶、蜂蜜的添加回收率分别为(90 ±10)% 、(85 ±10)% 、(90 ±10)% ；平均批内和批间变异系数均小于 15%；四环素与金霉素等同类抗生素的交叉反应率大于60% ，与其他类抗生素无交叉反应；此试剂盒在4 ℃可保存 180d 以上。结论：建立的试剂盒是符合技术指标的要求，可用于动物源性食品中四环素类抗生素残留的定量检测。 关键词：食品；四环素；单克隆抗体；竞争酶联免疫 Development of A New ELISA Kit for Tetracycline Residue Detection in Foods 1 2 1 1 1, 2 GUO Zhan-b ao ，WU Yu-xiang ，TIAN Wen-li ，ZHAO Ya-zh ou ，PENG Wen-j un * ，LIU Jia-peng (1. Institute of Apiculture Research, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Key Laboratory for Pollinating In sect Biology , Ministry of Agriculture, National Research and Development Center For Bee Product Processing, Beij ing 100093, China； 2. Huaan Magnech Bio-tech Co. Ltd., Beij ing 102200, China) Abstract ：A competitive ELISA kit for tetracycline (TC) residues detection was developed by employing TC monoclonal antibody prepared by hybridoma technology using anti-TC monoclonal antibodies secreted by immunized BALB/c mouse. Performance tests showed that the logit/log calibration curve of the kit was y = －2.3x + 2.79 (correlation coeffici