第三章_植物器官和组织培养.ppt

一、无菌外植体的获得 1、茎尖、茎段、叶片的灭菌 2、根、块茎、鳞茎的灭菌 3、花蕾的灭菌 4、果实、种子的灭菌 3.2.3、植物叶培养 以叶器官为外植体进行的离体培养。 叶器官包括：叶原基、叶柄、叶鞘、叶片、叶肉、子叶。 再生成植株的方式： 直接诱导形成芽， 先诱导形成愈伤组织，再经愈伤组织分化成植株。 1．叶形 椭圆形 扇形 叶器官经过灭菌和切割后，在适宜的条件下培养，其结果可能是是：1、不定芽或胚状体；2、愈伤组织；3、成熟叶。 叶的器官培养 愈伤组织 方法： 1）外植体消毒：幼嫩叶片冲洗干净 用70％酒精10s 饱和漂白粉液浸3～15min（或在0．1％L汞中浸3-5min） 无菌水冲洗3～4次 无菌干滤纸吸干 待用。 2）接种：灭菌过的叶组织切成约0．5cm见方小块或薄片(如叶柄和子叶) 接种在MS或其他培养基上 3)培养基：MS ＋ BA1-3mg／L ＋ NAA0．25mg／L 4)培养： 叶接种后培养条件为每天10-12h光照，光强1500-30001x。 2、影响离体根发生和生长的因素 a 培养基的种类 多采用MS ，Heller 基本培养基 b 生长调节剂 多使用NAA TDZ 2，4—D等 c 植物材料 不同植物、不同基因型、不同叶龄 d 培养方式 固体培养 e 光照和温度 f pH 第三节 植物繁殖器官培养 意义： 可离体快速繁殖 可改变染色体倍性 挽救远源杂种胚 诱导三倍体植株 3.3.1、花器官培养 定义：指对植物的整朵花或花的组成部分（花托、花柄、花瓣、花丝、子房、花药、胚珠等）进行离体培养。 意义：进行花性别鉴定、果实和种子发育、花形态发生等研究 材料：未开放的花蕾或花柄、花托、花瓣等 3.3.2、植物幼果培养 定义：对不同发育时期的幼小果实进行离体培养。 3.3.3、种子培养 意义：打破休眠、缩短生活周期 挽救远缘杂交、提高杂种萌发率 可形成：小植株、愈伤组织、丛生芽或不定 芽等 第四节 植物组织培养 定义：是指狭义的组织培养,即外植体是各种类型的组织。如分生组织、愈伤组织、薄壁组织等。 3.4.1、分生组织培养 分生组织包括：根尖、茎尖等顶端分生组织和形成层组织。 他们具有很强的分裂与分化能力，离体培养时可以形成完整植株 以茎尖培养为例： 茎尖培养是切取茎的先端部分或茎尖分生组织部分，进行无菌培养。这是组织培养中用得最多的一个取材部位。 根据培养目的和取材大小可分为微茎尖培养和普通茎尖培养。微茎尖指带有1-2个叶原基的生长锥，其长度不超过0．5mm。普通茎尖指较大的茎尖(如几mm到几十mm)、芽尖及侧芽。 特点：技术简单，操作方便，茎尖容易成活，成苗所需时间短。 茎尖培养步骤如下：(1)取材 (2)消毒接种 (3)接种 (4)培养的方法和程序 ①培养基  ②培养条件  ③继代培养  ④诱导生根 (5)移栽入土 3.4.2、植物愈伤组织培养 愈伤组织定义：是指外植体在特定情况下产生的一种疏松或致密、无特定形态结构功能的一团无序生长的薄壁细胞。 产生原因：经过灭菌或切割后，在适当的环境下产生的。 一般薄壁细胞和形成层易形成愈伤组织。 特点：或疏松或致密；颜色不一；可形成一些“胚胎发生丛”或胚性愈伤组织；生长迅速，通常在黑暗或弱光下进行。 愈伤组织 3.4.3、植物薄层组织培养 外植体材料：薄细胞层（ 3~6层），在适宜条件下，可以获得不同的器官。 如烟草花序轴3~6层表皮及表皮下细胞组成的薄壁组织。 培养条件：培养基，激素，环境因子。 诱导结果：在不同培养基中可得到花芽、营养 芽、根或愈伤组织。 花梗的薄层组织培养 第三章 植物的器官和组织培养 班级：09生物教育班 姓名：陈** 学号：0912**** 注：部分是根据他人的。望你们见谅！ 概念 什么是植物器官培养？（是指对植物某一器官的全部或部分或器官原基进行离体培养技术） 其分为：营养器官和繁殖器官培养。 包括有:根、茎、叶、花、果实、种子。 什么是植物组织培养（即狭义的）？ 包括分生组织、表皮组织、薄壁组织等及产生的愈伤组织的培养 本章内容提要： 第一节、器官和组织培养基本程序 第二节、植物营养器官培养 第三节、植物繁殖器官培养 第四节、植物组织培养 后续 第一节 器官和组织培养基本程序 包括以下几方面：