显微镜的基本知识与使用课稿.ppt

显微镜的基本知识与使用 工欲善其事 必先利其器 显微镜的基本结构（两大部分） 光学系统 机械装置 一、显微镜的光学系统（四个主要部件） 物镜、目镜、聚光镜和光源系统。 其次还包括滤光片、载玻片和盖玻片。 （一） 物镜 物镜是显微镜的最主要部件，放大及分辨作用。其优劣直接决定了显微镜的主要光学性能。 为了校正象差和色差物镜都由多块透镜组成，而且放大倍数越高，结构越复杂。 一般的物镜所观察到的像面总是有些弯曲，平场物镜可以较好地校正像面弯曲，使整个视场平坦,但其结构也相应地复杂些。 有的油镜内还装有弹簧，在物镜前端受压时，镜头可以退缩回来。这样一方面可以保护镜头，另一方面也不会把载玻片和盖玻片压碎。这种物镜称为弹簧物镜。 1.物镜的分类 按象差（三类） ： A.消色差物镜：这是最常见的物镜，虽然能完全校正光谱中红光和F青光的色差，但还不能完全矫正其他色光的色差。 B.复消色差的物镜：透镜一部分用荧石制成，性能很高，能使光谱中的红光、蓝光和黄光在同一焦平面上成象。 C.平场物镜：由于场曲的存在而使视场边缘的象模糊不清，研制了平场消色差物镜和平场复消色差物镜。 按放大倍率 A.低倍物镜：放大倍率1X-5X，数值孔径0.04-0.15 B.中倍物镜：放大倍率5x-25x,数值孔径0.15-0.6 C.高倍物镜：放大倍率25x-100x,数值孔径0.60-1.40 根据使用方法 A. 浸液系物镜：这是物镜与标本之间加入某种液体的物镜。根据浸液的种类，可分 为油浸系和水浸系两种。使用油浸系物镜时，通常加入柏木油（折射率为1.515）；使用水浸系物镜时，加入水（折射率为1.33）。此外，还有甘油浸或石腊油浸系的特殊物镜。 B.干燥系物镜：干燥系、水浸系和浸油系物镜，各有特殊的用法。干燥系物镜不可用油浸，油浸性 物镜不可用水浸。 物镜的工作距离：指的是从物镜前组最前面一块透镜的表面到被观察标本的距离。这个距离不大，如上所述的10X、40X和100X物镜的工作距离分别为7.634、0.53和0.198毫米。如果再考虑到透镜的金属零件的厚度，这个距离就更小了。因此，在使用时，物镜和标本是靠得很近的，高倍物镜尤为如此，几乎要碰上标本了，这就要求我们在调焦时要特别小心，以免碰坏镜头或损坏标本。 物镜通常都标有表示物镜光学性能和使用条件的一些数字和符号。如40/0.65和160/0.17。此处的40表示它的放大倍数（有的写成40×或40：1）；0.65表示它的数值孔径（有的写成N.A.1.65或A.0.65）；160表示使用该物镜时，显微镜的机械筒长应为160mm；0.17表示使用该物镜时，盖玻片的厚度应为0.17mm。有些低倍物镜，在有、无盖玻片的情况下都可以使用，所以不标0.17而代之以横线-。有些油镜上标有油（oil）字 （二） 目镜 目镜作用是把物镜放大后的像作进一步的放大，使人眼睛能够清楚地观察标本。它有单目和双目两种工作方式。 目镜可分为惠更斯目镜、冉斯登目镜、平常补偿目镜、平场广视野目镜和其他特殊目镜等多种。其中上下两块透镜的凸透面都朝下的惠更斯目镜在普通显微镜上用的最多。平场补偿目镜一般标有P，国产也有标有PB的。它和平场物镜相配用。属于高档目镜。 （三） 聚光器 聚光器大都通过手旋螺丝固定在镜台下面。它由聚光镜和可变光阑两个部件组成。聚光镜的作用是将光源来的光线会聚到标本上，以便观察。可变光阑又叫光圈，装在聚光镜的下方，由十几块金属薄片组成。中央通光孔为圆形，移动可变光阑的把手，可以任意调节通光孔的大小。 聚光器的主要参数是数值孔径。但它的数值孔径是可变的，受光阑孔的大小控制，光孔开大，数值孔径增大，反之则减小。聚光镜外壳上的是数值孔径的最大值。为了充分发挥物镜数值孔径的作用，在观察时，聚光镜的NA值应等于或略大于物镜的NA值， 除了上述普通的聚光镜外，还有暗视场聚光镜、相衬聚光镜、偏光聚光镜等多种用途的聚光镜，以满足不同场合的使用。 （四） 光源系统 光源系统用来供给照明标本用的光线。显微镜所用的光源有自然光和电光源两种。 使用电光源的显微镜，其光源系统由光源灯电路、光源灯、透镜、反射镜的等组成,系统通常安装在灯座内。 使用电光源的显微镜一般都采用柯勒照明方式。它是将光源的灯丝像经两路成像在标本的上方，而不是像临界照明那样直接落在标本上。这种照明方式可得到比较均匀的照明。 光源灯一般使用钨灯、卤素灯和LED。 光源灯的电路部分大都设有光亮调节器，可以很方便调节照在标本上光的亮度。 （五） 其它 1.滤光片 有些显微镜配有不同波长的滤光片供选用。 2 .载玻片和盖玻片 顾名思义，载玻片是用来承载样本的，盖玻片是用来覆盖样本的。即，通常观察标本时