第6章 实验 观察根尖分生组织细胞的有丝分裂(共16张PPT).pptx

实 验 观察根尖分生组织细胞的有丝分裂;1.植物分生组织细胞的特点：有丝分裂较为旺盛。在高等植物体内，有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞。 2.细胞分裂具有独立性：某一时刻，同一组织的不同细胞，可处于细胞周期的不同分裂时期；在高倍镜下，根据染色体的形态和数量，识别有丝分裂的不同时期。 3.染色体的特性：染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液)着色。;1.实验材料： (1)选材部位具有持续分裂能力，如根尖、芽尖。 (2)选择染色体数目较少的生物，便于染色体的计数。 (3)选择分裂期占细胞周期时间比例大的细胞，易观察到分裂期细胞。;2.试剂的成分及作用：;3.显微镜的使用： (1)先用低倍显微镜找到分生区的细胞，分生区细胞呈正方形，排列紧密。 (2)再用高倍显微镜找到中期的细胞，因为中期细胞中染色体的形态更为清晰和固定，然后再找前期、后期、末期的细胞。;1.洋葱根尖培养：实验前3～4 d，待根长到5 cm 2.装片制作： (1)取材：取根尖2～3 mm。 (2)解离。 ①解离液：质量分数为15%的_____和体积分数为95%的_____ 混合(1∶1)。 ②目的：使组织中的细胞相互_______。 ③时间：_________。 ④程度：根尖酥软。;(3)漂洗。 ①漂洗液：_____。 ②目的：洗去_______，便于染色。 ③时间：约10 min。 (4)染色。 ①染液：质量浓度为0.01 g/mL或0.02 g/mL的___________ 或___________。 ②目的：使_______着色。 ③时间：3～5 min。;(5)制片。 用镊子将根尖取出放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子尖 把根尖弄碎，盖上_______，再加一块_______，用拇指轻轻 按压载玻片。;3.观察 4.绘图：绘制有丝分裂中期图。;1.使根尖细胞相互分散的方法： (1)解离时盐酸可破坏细胞壁的果胶层，使组织细胞分离。 (2)制片时用镊子把根尖弄碎。 (3)压片可使细胞尽可能呈单层铺展。;2.实验过程中的注意事项： (1)取材的两点提醒。 ①剪取生长旺盛、带有分生区的根尖或芽尖。 ②选材时不能单纯以分裂期所占时间的长短作为选材标准，而是应该选择分裂期占细胞周期时间比例大的材料，因为此种材料分裂期的细胞数目较多，易观察。;(2)解离。 ①剪取根尖时间：一般在上午10时至下午2时左右，此时分生区细胞分裂旺盛。 ②严格控制解离时间：一般解离时间控制在3～5 min。若时间过短，细胞在压片时，不易分离开；若时间过长，导致解离过度，无法取出根尖进行染色制片。;(3)漂洗。 ①漂洗顺序：先漂洗后染色，顺序不能颠倒，否则解离液中的盐酸会干扰染色效果。 ②漂洗目的： a.防止解离过度，根尖过度酥软。 b.洗去盐酸，防止与碱性染液发生作用，影响染色效果。;(4)染色：染色时要掌握好染色液的浓度和染色时间，若染色时间过长，染色过深，显微镜下会出现一片紫色，无法正常观察染色体。 (5)压片：压片时用力要恰当，过重会将组织压烂，过轻则细胞未分散开来，用力过重或过轻都会影响观察。;3.实验结果及分析： (1)视野中最多的细胞：分裂间期的细胞。因为在一个细胞周期中，间期所占的时间占整个细胞周期的90%～95%，时间与细胞数目成正比。 (2)视野中往往不容易找全有丝分裂各个时期的细胞，可以移动装片，从邻近的分生区细胞中寻找。 (3)观察到的不同时期细胞数目的多少反映出各时期经历时间的长短，间期细胞数目最多。;4.四种常见异常情况分析： (1)细胞重叠看不清：根尖解离和制片把握不好，使细胞重叠，难以观察到正常分裂各时期图像。 (2)大多数为长方形细胞：取材不当，不是分生区细胞，细胞已分化。 (3)找不到图像：未对好光或光线亮度不够好，也有的是未调好焦距。 (4)装片中出现气泡：载玻片上滴的清水少或盖玻片的盖法不对。