猪A组轮状病毒Vp4全基因的克隆与序列分析.pdf

吉林农业大学学报2005，27(5)：549—553 JournalofJilinAgricultural University 猪A组轮状病毒Vp4全基因 的克隆与序列分析+ 王春凤7，于守平7，杨树宝2，李玉2” 331 摘要：应用RT—PCR技术，从猪A组轮状病毒总RNA中扩增了2bp的Vp4全基因，通过T—A克隆技 术，将PCR产物克隆至克隆载体pGEM—T中，转化至受体菌株JMl09中，通过质粒提取、限制性内切酶酶切、 酸序列，结果显示该实验株与黑龙江株和美国株的同源性最高，均达到99％以上，并具有轮状病毒vp4全基 因的抗原袁位区。 关键词：轮状病毒；vp4全基因；克隆与测序 中图分类号：$852．65 文献标识码：A 文章编号：1000-5684(2005)05—0549—05 and ofFull Geneof APorcineRotavirus Vp4 Group CloningSequencing yu2 WANG Shu—ba01，LI Shou—pin91，YANG Chun．fengI，YU Scienceand 18，Chi— (1．CollegeofAnimal Technology，JilinAgriculturalUniversity，Changchun1．301 M；2．Institute 130118，China) ofMycology，JilinAgriculturalUniversity，Changchun of of ARotavimswere fromcell Abstract：Thedeterminants antigenic Vp4geneporcinegroup amplified of infectedwithmtavimsthereverse chainw_action(RT—PCR)．The by transcripfion．polymerase length full was2331 ofRT—PCRwere with and Vp4gene bp．Theproducts ligatedplasmidpGEM—Teasy to the ofrestrictionendonuclease and re- transformed analysis cutting，PCRsequencing，the JMl09．By resultsofnucleotideandaminoacidse- combinant wasconstructed．The plasmidspGEM—T—Vp4