重组轮状病毒VP4抗原表位表达及动物免疫学特征的分析.pdf

中国医学科学虢中甬协郓医科夫学碗}：论文 摘要 轮状病毒(Rotavirus，RV)是婴幼儿胃肠炎的主要病原，世界范围内的儿 奄儿乎全都感染过Rv。对RV的感染除了对症处理外并无特效药物，因此研 究和开发安全有效的轮状病毒疫苗具有很需要意义。轮状病毒疫苗的研究工 作虽然取得了一些成绩，但总体而言，以往开发的预防疫苗因各种原因均达 不到应有的效果。RV疫苗必须进～步深入研究。 在RV中VP4是其主要的血清交叉中和抗原蛋白。为了探讨轮状病毒VP4 抗原表位的动物免疫保护性作用，我们应用基因工程技术，以昆虫病毒 FHV—RNA：为载体，构建了A组轮状病毒SAl1的VP4胰酶切割位点上游、下游 aa)、 和横跨切割位点抗原表位的氨基酸序列片段：抗原表位REA(223—243 REB(243—263aa)和REC(234—251 aa)。这三个抗原表位分别插入载体蛋白 中高效表达了这三个VP4抗原表位，并进一步进行了表达、纯化和定量，得 到一个嵌合的重组抗原表位RNA：一REABC。用表达的重组RV抗原表位 疫过的小鼠，观察小鼠的临床反应，收集和检测小鼠粪便中的Rv抗原，检测 学保护作用，探讨重组RV抗原表位RNA2一REABC在开发重组RV抗原表位皿单 位疫苗中的前景。 受参照RV株SAl 1和wa的攻击，减轻临床症状，减小病毒排出量，减少病毒 排出时间。本研究结果提示：用FHV—RNA。作载体表达的重组Rv抗原表位 RNA2一REABC，能诱导动物产生很好的免疫保护作用，为进一步发展重组Rv抗 原表位亚单位疫苗打下了坚实的基础。 关键词：轮状病毒； VP4, 熏组轮状病毒抗原表位； FHV-RNA2载体系统： pET表达系统；动物保护 一…一一一一生鉴塑丝!旦丝丝型塑兰型：—— Abstract ininfants． the seriousdiarrhea causing pathogen Rotavirus(RV)ismajor inadditiontothe theRVinfection isnoeffectivemedicinefor There allopathy．It effectiverotavirus tothe istherefore to an vaccine．Uppresent， necessarydevelop aaenuated wehave three in rotavirusvaccine：oral developing phases undergone and subunit vaccinerecombinant live reassortant vaccine．However, vaccine，gene