血管内皮祖细胞改善骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞的增殖及凋亡.doc.doc

血管内皮祖细胞改善骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞的增殖及凋亡 刘竹影1，陈 颖2，刘 倩1，梁 源1，张 瑞1，文 艺1，丁 寅1(1解放军第四军医大学口腔医院正畸科，军事口腔医学国家重点实验室，陕西省西安市 710032；2解放军第四军医大学药学院天然药物学教研室，陕西省西安市 710032) 引用本文：刘竹影，陈颖，刘倩，梁源，张瑞，文艺，丁寅. 血管内皮祖细胞改善骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞的增殖及凋亡[J].中国组织工程研究，2016，20(14):1999-2006. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.14.003 ORCID: 0000-0001-9938-2878(丁寅) 文章快速阅读： 文题释义： 血管内皮祖细胞：1997年Asahara首次报道由外周血获得能分化为血管内皮细胞的前体细胞，此细胞表达CD34和血管内皮细胞生长因子受体2，在体外培养呈典型的长梭形，可形成管腔样结构，能够表达内皮细胞的特异性抗原，在缺血性动物模型中可观察到它们参与血管的生成，故命名为血管内皮祖细胞。研究发现，血管内皮祖细胞在组织工程骨中参与了血管的再生和修复。 Transwell间接共培养：此项技术的特点在于运用一种特殊的共培养工具进行细胞共培养，观察两种细胞的相互作用。该技术关键部分在于杯子底层有一张有通透性的聚碳酸酯膜，这层膜带有微孔，孔径最大为12.0 μm，最小为0.1 μm，使得培养的两细胞不能相互接触，实现非接触性共培养。观察血管内皮祖细胞对去势骨髓间充质干细胞增殖及凋亡特性的影响。 ①选用6周龄健康雌性SD大鼠行双侧卵巢切除术，建立骨质疏松症动物模型，假手术组仅切除卵巢周围等量脂肪组织；②采用密度梯度离心结合差速贴壁法分离、培养大鼠骨髓间充质干细胞；采用密度梯度离心法结合差速贴壁法利用促进内皮细胞生长的条件培养基诱导培养血管内皮祖细胞；③利用Transwell小室建立血管内皮祖细胞、去势骨髓间充质干细胞间接共培养体系，另设置正常骨髓间充质干细胞-骨髓间充质干细胞组，去势骨髓间充质干细胞-骨髓间充质干细胞组；④采用流式细胞术检测血管内皮祖细胞对去势骨髓间充质干细胞增殖和凋亡的影响。 ①间接共培养第3天，血管内皮祖细胞与去势骨髓间充质干细胞共培养组的S期细胞比例显著大于去势骨髓间充质干细胞组和正常骨髓间充质干细胞组，差异均有显著性意义(P 0.05)；②间接共培养第10天，血管内皮祖细胞与去势骨髓间充质干细胞共培养组骨髓间充质干细胞凋亡率显著  Indirect co-culture with endothelial progenitor cells improves proliferation and apoptosis of bone marrow mesenchymal stem cells of osteoporosis rats Liu Zhu-ying1, Chen Ying2, Liu Qian1, Liang Yuan1, Zhang Rui1, Wen Yi1, Ding Yin1 (1State Key Laboratory of Military Stomatology, Department of Orthodontics, School of Stomatology, the Fourth Military Medical University, Xi’an 710032, Shaanxi Province, China; 2Department of Natural Medicines, School of Pharmacy, the Fourth Military Medical University, Xi’an 710032, Shaanxi Province, China) Abstract BACKGROUND: Previous studies have found that estrogen deficiency causes a reduction in the activity of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs). OBJECTIVE: To explore the effect of endothelial progenitor cells (EPCs) on the BMSCs proliferation and apoptosis ability of osteoporosis rats. METHODS: Healthy female Sprague-Dawley rats, 6 weeks old, were enrolled and s