基于中药血清药物化学方法的逍遥散治疗黄褐斑的药效物质基础研究.pdf

世界科学技术— 中医药现代化★专题讨论：中药血清药物化学研究 基于中药血清药物化学方法的逍遥散治疗 黄褐斑的药效物质基础研究＊ □张 宁＊＊ 李会娟 祁永华 陈巧云 王喜军＊＊ （黑龙江中医药大学 哈尔滨 150040） 摘 要：目的：利用中药血清药物化学的方法，初步确定逍遥散治疗黄褐斑的药效物质基础及其作 用机理。方法：通过建立逍遥散经口给药后大鼠血清色谱指纹图，确定大鼠血中移行成分的生药来源，并 以血清色谱指纹图为指导，以血中移行成分来源生药为原料，定向富集制备逍遥散提取物；采用体外培 养的小鼠B16 黑素瘤细胞株，以熊果苷为阳性对照药，用MTT 法、多巴氧化法、NaOH 裂解法评价逍遥散 提取物对细胞增殖、酪氨酸酶活性和黑素合成的影响，探讨逍遥散治疗黄褐斑的药效物质基础及作用机 理。结果：逍遥散经口给药后大鼠血中发现了14 个入血成分，其中4 个为血中原型成分，10 个为原型入 血或代谢产物，分别来自于柴胡、当归、白芍、甘草、茯苓。定向制备的逍遥散提取物对B16 细胞酪氨酸酶 活性和黑素合成有明显的抑制作用，作用强度呈浓度依赖性。结论：逍遥散的血中移行成分具有抑制 B16 细胞酪氨酸酶活性和黑素合成的作用，是逍遥散治疗黄褐斑的药效物质基础。 关键词：逍遥散 血清药物化学 B16 细胞 黄褐斑 doi: 10.3969/j.issn.1674-3849.2010.04.032 黄褐斑（Chloasma）是一种获得性色素沉着皮肤 前中医药学及美容领域的一个研究热点。 病，病程顽固，严重影响患者美观，给患者精神和生 逍遥散具有疏肝解郁、调和气血之功用，是治 活方面带来诸多烦恼和痛苦。中医认为黄褐斑多因 疗肝郁脾虚的常用方剂，且在临床上广泛应用于黄 肝郁脾虚所致的脏腑气血失调所致。虽然中西医治 褐斑的治疗，但实验研究基础薄弱。本研究拟利用 [1] 疗黄褐斑的药物和手段比较多，但或因疗效过于缓 中药血清药物化学的方法 ，从逍遥散体内直接作 慢、或因不良反应太多，一直未有一种疗效显著、安 用物质出发，在细胞水平上直接阐明逍遥散治疗黄 全、公认、令医患都满意的治疗方案。因此，寻找组 褐斑的药效物质基础。 方合理、高效安全的中药美白祛斑制剂，已成为目 一、实验材料 收稿日期：2010-06-12 1. 仪 器 修回日期：2010-07-28 ＊ 黑龙江省科技厅青年科学基金（QC08C11）：基于中药血清药物化学的逍遥散治疗黄褐斑的有效成分及作用机理研究，负责人：张宁；黑龙江省 教育厅青年学术骨干教师资助计划（1154G15）：基于中药血清药物化学的逍遥散治疗黄褐斑的有效成分及作用机理研究，负责人：张宁。 ＊＊ 联系人：张宁，副教授，主要研究方向：中药药效物质基础及体内代谢研究，Tel ：0454-6050350 ，E-mail:zhang-ning2006@ ；王喜 军，本刊编委，教授，博士生导师，黑龙江中医药大学副校长，Tel:0451，E-mail:xijunw@ 。 〔World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica 〕 643 2010 第十二卷 第四期 ★Vol.12 No.4 Agilent 1200 series LC-MS 液质联用仪（G1322A 柱温：35℃ ；流速：1.0mL ·min-1 ；检测波长：280 nm ；流 Degasser ，G1311A Quat Pump，G1329A ALS，G1316A 动相：乙腈-0.2%磷酸水，梯度见表 1。 TCC ，G1315D DAD）；Venusil XBP C18 （4.6mm ×250mm