中药药效物质基础在中药血清药理学与血清药物化学中的研究进展.docx

? ? ? ? ? 中药药效物质基础在中药血清药理学与血清药物化学中的研究进展 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 关键词： 中药药效物质基础 中药血清药物化学 中药血清药理学 研究进展 1984年，日本学者Hiroko Iwama在对汉方药的研究过程中首次提出“血清药理学”和“血清药物化学”这两个重要概念，对药物物质基础研究的系统化和规范化具有里程碑式的意义。由于中药及中药复方成分复杂，若直接加入体外反应体系，其实验结果会与体内作用机制有所不同，且药物必须经过血液循环才能起作用（肠道直接起作用及外用药除外）。因此，我国学者提出了“中药血清药理学”和“中药血清药物化学”这两个概念，目的是为了探明中药入血起效的成分。血清药理学和血清药物化学是两个不同的研究领域，但它们之间又密切相关。在含药血清中，药物的化学成分与其药理效应是紧密相关的。因此，研究药物化学成分的本质及其药理效应，对促进药物药效物质基础研究的发展具有重要意义[1]。目前，国内学者逐渐将血清药理学和血清药物化学的研究运用到中药药效物质基础研究体系。研究中药药效的化学成分以及明确不同成分的药理效应，是关系到中药临床应用安全的关键因素，也是制约中药现代化及国际化发展的关键问题[2]。血清药理学和血清药物化学概念的提出与完善，以及化学分析手段的进步，有助于推动中药现代化研究的进一步发展。 1、中药血清药理学研究进展 中药血清药理学的研究方法与传统药物体外研究有所不同，它是指中药或中药复方在动物体内吸收及作用一定时间后，采集、分离动物血清，将含药血清作为药物直接加入体外反应体系，用体外模型进行药效评价的方法。通过模拟药物在体内的吸收和代谢反应过程，研究其药效及作用机制，既能减少中药粗制剂对体外实验产生的干扰，又符合中药经机体消化吸收、生物代谢后产生药理效应的生理过程[3]。 1.1 含药血清的制备 1.1.1 动物选择 邢作英等[4]认为在实验动物的选择上应注重制备血清的动物与实验所用离体器官、组织、细胞种属保持一致。血清成分十分复杂，不同种属的血清成分可能因在理化、生物等方面的差异以及免疫排斥反应，对实验结果产生影响，因此，选择合适的动物模型以及相应的体外反应体系，能更准确地反映药物在机体内的生物过程与药物效应。目前，含药血清主要来源于大鼠、豚鼠、家兔等。张声鹏等[5]报道在生理或病理状态下，机体对药物作用的反应不同，分离出的含药血清成分及含量也有所差异。因此，含药血清的制备不仅要选择合适的动物模型，还要考虑生理状态的影响。 1.1.2 给药、取血方案 实验动物的给药途径多样，其中灌胃给药是常见给药途径，其对机体伤害小，操作简单，被广泛运用。张宏等[6]在研究中提出使用以下公式作为灌胃给药量参考：每日给药量＝成人日用量/成人标准体质量×人与动物等效剂量换算倍数/培养基中含药血清浓度。实践过程中，最常用的是以临床等效关系为参考，通过预实验摸索最佳给药剂量。李仪奎等[7]提出以每天给药两次，连续给药3天，末次给药一小时后采血制备含药血清的通用实验方案，但也有学者提出采血时间不必局限于传统方法，可根据具体情况而定。含药血清的采集可以选择大鼠股动脉或下腔静脉采血法、家兔耳缘静脉或颈动脉采血法等[8]。 1.2 含药血清的处理及保存 血清成分复杂，含有多种微量活性物质，包括酶、抗体、补体、细胞因子等，这些活性物质在进入体外反应体系后，对结果造成的影响往往难以评估，因此在加入前，应将含药血清灭活，有助于减少非药理性的干扰，也符合防止微生物感染的细胞培养要求[9]。国内学者用得比较多的是水浴灭活法。但也有学者认为分离的含药血清可以不灭活处理，因为通过设立空白对照组血清，可以比较含药血清中药物的药理学效应[10]。血清的保存对实验结果同样会有影响，国内研究者依据实验时间，一般采用-20℃的短期保存和-80℃长期冻存。 1.3 中药血清药理学方法学研究 药理学研究理念和方法的不断完善是规范化、标准化中药血清药理研究的基础。近年来，中药血清药理学方法成为中药规范化、标准化研究的主要方法之一。魏元锋等[11]在研究过程中提出，通过使用现代分析技术，包括液相色谱法、液相色谱-质谱联用、超高效液相色谱-质谱联用、气相色谱-质谱联用等手段，分离、鉴定含药血清中的不同成分，建立血药成分的量效关系，是中药血清药理学药效物质研究的基础。含药血清实验方法的建立具有重要的临床意义，其不仅有助于进一步发现药物的有效成分或有效部位，还可以为制备药效明确的中药制剂以及提高临床疗效和降低毒副作用提供更贴近实际的参考[12]。近年来，我国学者在中药含药血清药理研究方面取得了一定进展，并对研究方法进行了较为系统的改进[13]。 2、中药血清药物化学研究进展 中药物质成分的分离和鉴定是中药