5-2黄酮类成分题稿.ppt

重量法定容 思考题 1、含黄酮类成分制剂进行定性鉴别的方法与原理？ 2、含黄酮类成分制剂进行定量的常用方法及其原理？ 常用于黄酮类化合物定量显色反应的试剂是（） A. 盐酸-镁粉 B. 盐酸 C. 甲酸钠 D. 醋酸钠 E. 三氯化铝或硝酸铝 E 含黄酮中药制剂鉴别可选用 （ ） A. 氢氧化钠溶液显色 B. 二氯氧锆显色 C. 盐酸-镁粉显色 D. 三氯化铝溶液显色 E. 泡沫反应 BCD 第二节 黄酮flavone类成分的分析 目的要求 了解黄酮类的理化性质，熟悉黄酮类定性鉴别。 掌握中药制剂内黄酮类的供试液的提取纯化制备方法、定量测定的原理和方法。 第五章中药制剂中各类成分分析 一、概述 ? 二、理化性质 三、黄酮类成分的定性鉴别 四、黄酮类成分的定量分析 五、应用实例 　　黄芩、淫羊藿、葛根、陈皮等 主要内容 一、概述 1、自然界存在形式：苷元（非糖部分）、苷(与糖结合)。 2、基本结构类型 （2-苯基色原酮） 1、溶解性（供试液制备） 游离黄酮：难溶于水，较易溶于MeOH, EtOH, EtOAC.（Et乙基） 黄酮苷：可溶于热水, MeOH, EtOH, EtOAc等强极性及中极性溶媒。 难溶或不溶于弱极性有机溶媒中CHCl3、C6H6。 ∴对于含黄酮类成分的制剂，常用醇来提取制备样品液。 二、理化性质 2、酸碱性 酸性：黄酮类化合物因分子中多有酚羟基，故显酸性，可溶于碱性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺中。酸性强弱：7,4‘- 二羟基 7-或4‘- 羟基 一般酚 5-羟基 碱性氧原子的性质 3、显色反应 盐酸-镁粉（锌粉）反应 金属盐类试剂的配合反应 可用于鉴别，但要避免假阳性结果 4、紫外光谱特征 2-苯基色原酮具有特定的紫外吸收 三、黄酮类成分的定性鉴别1、化学显色反应鉴别 常用： 还原反应 金属盐类试剂 (1)还原反应Ⅰ、盐酸－镁粉反应 检识黄酮类成分的最常用方法之一。 A、原理：黄酮类成分经还原后生成花色苷元及其二聚物，呈红色。 B、操作步骤 a、适当方法提取分离制备样品液，常用乙醇、甲醇、EtOAc为溶媒。 b、取样品液1～5ml＋少许镁粉→振荡→＋浓HCl数滴→呈红色 c、建立方法与考察干扰情况时，需作对照(阴性、假阳性)。 d、结果 阳性：呈橙至红色。说明可能有黄酮、黄酮醇及其二氢化合物存在。 D、举例 如：药典中牛黄解毒片、清喉咽合剂、葛根芩连片中都含有黄芩。 黄芩：含黄酮类化合物，主要为黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素、黄芩新素Ⅰ、Ⅱ等，且具Ｃ5OH, 黄芩素及其苷具邻二酚OH。 ∴可用还原反应及与金属盐类试剂的络合反应定性鉴别。 例： 牛黄解毒片的定性鉴别方法 取６片去衣＋乙醇10ml→△10min→滤液→取滤液1～5ml＋少许镁粉→振荡→＋浓HCl数滴→△→呈红色。 结论：阳性。 取６片去衣＋乙醇10ml→△10min→滤液→取滤液1～5ml＋浓HCl数滴→△→呈红色。 结论：假阳性。 (２)与金属盐类试剂的络合反应 Ⅰ、锆盐－枸橼酸显色反应 黄色不退　示有C3-OH 黄色消失　示有C5-OH 样品甲醇液 ＋ 2％ZrOCl2 示有C3-OH,C4=O;C5-OH,C4=O →黄色 ↓ 检出区别C3-OH,C4=O与C5-OH,C4=O黄酮类。 举例：银黄注射液的定性鉴别 --银黄注射液1.0ml+5%亚硝酸钠,10%硝酸铝液各0.30ml→↓阳性 --银黄注射液0.1ml+水10ml→取此稀释液2.0ml→+2～5%ZrOCl2 2滴→显色→＋2％枸橼酸甲醇液→褪色。 ２、薄层色谱鉴别 TLC是含黄酮类成分制剂最常用的定性方法。 硅胶薄层色谱：分离弱极性化合物较好； 聚酰胺薄层色谱：分离含游离酚羟基的黄酮及苷颇为理想； 纤维素薄层色谱：适于分离多糖苷混合物。 (1)硅胶薄层色谱 Ａ、原理：用硅胶分离黄酮类－－遵循正相色谱层析规律；化合物极性越强，所需溶剂极性越大。其Ｒf 值顺序如下: RCH3 ＞RH＞ROCH3 ＞R-O-糖＞ROH Ｂ、常用的溶剂系统如下，其配比可根据需要加以调整。 甲苯-乙酸乙酯-甲酸（5：4：1）：黄酮苷元； 苯-甲醇（95：5）：黄酮苷元； 苯-甲醇-乙醇（35：5：5）：黄酮苷 氯仿-甲醇（8：2）：黄酮苷元及苷 甲苯－甲酸乙酯－甲酸（5：4：1）： 双黄酮 Ｃ、举例１愈风宁心片 主要组成为葛根，定性检出葛根素。 第一步：制备供试样品液：取片，去衣，研细，甲醇提取。 第二步：点样：将供试样品液与对照品溶液(葛根素)点于同一块硅胶G薄层板上。 第三步：展开：