香蕉MaACO8基因启动子克隆与活性分析研究.docx

香蕉MaACO8基因启动子克隆与活性分析研究

目录

香蕉MaACO8基因启动子克隆与活性分析研究（1）．．．．．．．．．．．．．．．．4

研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.1香蕉产业概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.2MaACO8基因在香蕉生长发育中的作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

1.3基因启动子在基因表达调控中的重要性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

2.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

2.1.1香蕉品种及来源．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

2.1.2酶切及连接试剂．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

2.2基因克隆与序列分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

2.2.1基因提取与纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

2.2.2启动子序列的扩增与克隆．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

2.2.3序列比对与同源性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

2.3启动子活性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

2.3.1重组载体的构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

2.3.2启动子活性检测方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

2.3.3重组表达载体的转化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

结果与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

3.1MaACO8基因启动子克隆结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

3.1.1启动子序列的克隆与验证．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

3.1.2启动子序列的保守性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

3.2启动子活性分析结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

3.2.1重组载体表达活性评估．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

3.2.2启动子活性在不同组织中的表达差异．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

3.2.3启动子活性与香蕉生长发育的关系．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

讨论与展望．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

4.1MaACO8基因启动子克隆与活性分析的意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

4.2启动子活性分析结果对香蕉遗传改良的启示．．．．．．．．．．．．．．．．31

4.3研究局限性及未来研究方向．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32

香蕉MaACO8基因启动子克隆与活性分析研究（2）．．．．．．．．．．．．．．．33

一、内容描述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

1.1研究背景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

1.2研究目的与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

1.3研究方法概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

二、材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．37

2.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．38

2.1.1香蕉组织样本．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39

2.1.2基因组DNA．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．40

2.1.3MaACO8基因序列信息．