瓜尔胶酶解法制备半乳甘露低聚糖及其产物表征.pdf

No．12 亿学与生物互程2009，V01．26 囫 ChemistryBioengineering 瓜尔胶酶解法制备半乳甘露低聚糖及其产物表征 赵晓峰。姚评佳，魏远安 (广西大学亚热带生物资源利用保护重点实验室，广西南宁530004) 0．3 0A、50℃下的最佳酶解条件为：pH值7．0，酶解时间10h、加酶量40 糖残基支链。 关键词：瓜尔胶；半乳甘露低聚糖；J争甘露聚糖酶；表征 中图分类号：Q814TS244 文献标识码：A 文章编号：1672—5425(2009)12—0037--04 限公司；甘露二糖、甘露三糖、甘露四糖，Sigma公司； 伊甘露聚糖酶(pMannanase)是一类能够水解含 有伊1，4一肛甘露糖苷键的甘露多糖的水解内切酶，广 柠檬酸、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠，酒石酸钠、3，5-Z．硝 泛应用于甘露低聚糖的工业化生产口’2]。其水解底 基水杨酸等均为国产分析纯。 物——甘露多糖包括葡甘露聚糖和半乳甘露聚糖两大 UV一1700型紫外可见分光光度计，岛津公司；恒 类，前者以魔芋粉为代表，后者包括瓜尔豆胶、野皂荚 温培养摇床，上海智城分析仪器制造有限公司；201DC 胶、田菁胶和胡芦巴胶等。其中魔芋粉的酶解产物是 6型 葡甘露低聚糖(Mannan-oligosaccharides，MOS)，文献冷冻干燥机，美国Labconco公司；高速冷冻离心机，美 报道较多[3“]。 AV500 国Beckmann公司；AVANCEMHz型超导核 半乳甘露聚糖的主链与葡甘露聚糖相似，均由p 甘露糖通过伊1，4一糖苷键连接而成。但是侧链则是不 DI—TOF质谱仪，Bruker 均匀地由单个n半乳糖通过旷1，6一糖苷键连接在主 字显示电动搅拌机，上海标本模型厂；旋转蒸发仪，上 链的口甘露糖元的C。上。近来，有关伊甘露聚糖酶 海亚荣生化仪器厂。 水解半乳甘露聚糖的工艺条件和水解产物的结构特 1．2酶解法制备半乳甘露低聚糖 点，陆续有所报道[5’6]，但对产物的表征手段仅限于 以0．3％(质量分数，下同)的瓜尔胶液为底物，加 TLC、IR、XRD等。 入一定量的伊甘露聚糖酶[加酶量以u·(g瓜尔 作者在此以瓜尔胶作为p甘露聚糖酶(只对主链 上的伊1，4一糖苷键进行酶切，而对口一1，6一糖苷键不起 rain，得到半乳甘露低聚糖(GM()S)。 作用)的酶解底物，优化了其酶解条件，并采用时间飞 为了测定瓜尔胶的降解程度，将酶解液离心，取上 行质谱(MALDI—TOF)、nCNMR表征了产物结构。 清液适当稀释后用DNS法[73测定酶解液中的还原糖 1 实验 (以甘露糖计)。按式(1)计算瓜尔胶的酶解率。 1．1材料、试剂与仪器 酶解率=絮蒜器箍铲×·00％ ㈤ 瓜尔胶，北京瓜尔润公司；p甘露聚糖酶，北京微 以每分钟酶解瓜尔胶产生lFmol相当于甘露糖 科创业生物技术公司；甘露糖，捷瑞生物工程(上海)有 的还原糖的酶量定义为1个p甘露聚糖酶单位(U)。 基金项目：广西壮族自治区科技厅应用基础研究专项资助项目(桂科基0991004号) 收稿日期：2009--09—15 gxu．edu．ca。 赵晓峰等：瓜尔胶酶解法制备半