T HTCMA 085—2022 河南道地药材 菊花组织培养育苗技术规程.pdf
团体标准
T/HTCMA085-2022
河南道地药材菊花组织培养育苗技术规程
Henandao-diherbs-TechnicalSpecificationfortissuecultureofchrysanthemum
seedling.
2022-11-01发布2023-01-01实施
河南省中药材协会发布
目 次
前言I
菊花组织培养育苗技术规程1
1范围1
2规范性引用文件1
3术语与定义1
4设施设备2
5组织培养2
6温室驯化3
菊花组织培养育苗技术规程
1范围
本标准规定了菊花组织培养育苗的术语和定义、设施设备、组织培养和温室驯化。
本标准适用于组织培养育苗的术语和定义、设施设备、组织培养和温室驯化。
2规范性引用文件
下列文件所包含的条款,通过在本标准中引用而构成为本标准的条款。凡不注日期的引用文件,其
最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
LY/T1882—2010林木组织培养育苗技术规程
3术语与定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1道地药材
道地药材是优质药材的专用名词,是指历史悠久、品种优良、产量较大、加工炮制规范、疗效突出,
带有明显地域特点的中药材。
3.2菊花
菊花(ChrysanthemummorifoliumRamat)为菊科、菊属的多年生宿根草本植物。
3.3组织培养
在无菌条件下,将离体的菊花幼嫩茎段、茎尖和腋芽在人工培养基和人工控制的环境中,使其再生
新植株的过程和技术。
3.4初代培养
在组织培养过程中,最初建立的外植体无菌培养阶段。
3.5继代培养
将初代培养获得的茎段或愈伤组织,通过分离切割接种在新的培养基中,从而获得大量无菌幼苗的
培养阶段。
1
4设施设备
4.1组织培养设施设备
4.1.1基本要求
组织培养室包括洗涤室、灭菌室、培养基配制室、缓冲室、无菌接种室和无菌培养室等。
4.1.2洗涤室设备
配备自动或半自动洗瓶机、水槽、收纳箱、量瓶架等。
4.1.3灭菌室设备
配备高压蒸汽灭菌锅、器械消毒器、紫外线灯、烘干箱、微孔过滤器等。
4.1.4培养基配制室设备
配备万分之一电子天平、酸度计、微波炉、冰箱等。
4.1.5缓冲室设备
配备衣帽柜、风淋装置等。
4.1.6无菌接种室设备
配备超净工作台、器械消毒器、酒精灯等。
4.1.7无菌培养室设备
配备培养架、紫外灯、臭氧发生器、空气加湿器、除湿机、时控装置等。
4.2温室驯化设施设备
配备温湿度调节装置、光照控制装置、灌溉设备、栽培床、穴盘等。
5组织培养
5.1外植体取材与灭菌
5.1.1外植体取材
选取生长健壮、无病虫害的菊花当年生幼嫩茎段、茎尖和腋芽,截取长度为0.5cm~3cm的芽段。
5.1.2外植体处理
将截取的芽段置于1%中性洗涤剂中浸泡10min,再用自来水冲洗20min。
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5.1.3外植体灭菌
在超净工作台内,将处理过的芽段置于无菌培养瓶中加入70%~75%的酒精中浸润30s,转入2%次氯酸钠
溶液中消毒8~15min,并不时摇动,最后于无菌水中漂洗3~5次,以获得无菌的外植体用于接种。
5.2培养基成分
芽段初代培养与继代培养所需培养基成分见附录A,培养基pH5.8。
5.3外植体的接种
将经过灭菌的芽段置于超净工作台内,