第十二章基因治疗.ppt

* 5、反义核酸基因治疗 反义技术：是指利用人工合成的反义RNA或DNA导入靶细胞，阻断Gene的转录或复制，控制细胞的中间阶段使编码蛋白的Gene不能转录为mRNA 或阻断翻译相应蛋白. * 反义基因治疗 DNA DNA  RNA RNA 反义RNA 阻断表达 * 有研究表明,一项试验性治疗黄斑病变的方法(即运用小RNA干扰技术来延缓中心区黄斑病变程度)可能引发一些病人失明,这种退行性病变主要发生于50岁以上的人群.某公司的临床研究曾经掩盖了人们对小RNA治疗弊大于利的担忧. 加利福尼亚大学的研究人员指出:“会不会治疗一种病变的同时,诱发另一种病变.” * 体内本身的小RNA可以通过关闭或沉默某些基因的表达来调节细胞功能。来自迈阿密的 OPKO Health和加州欧文的 Allergan两家公司的研发人员检测了小RNA的确可以减轻黄斑病变区的炎症;他们通过将小RNA注入病变区来抑制血管内皮生长因子(VEGF)的表达,进而抑制炎症加重. * 张康的研究小组比较了600例视网膜萎缩和非萎缩病人之间TLR3的差异. 发现TLR3某些突变可以保护病人免受进一步的炎症性萎缩。携带保护型突变TLR3的病人比正常基因型的病人罹患视网膜萎缩的危险低得多,程度取决于携带突变的比例.而相比之下,携带非保护型突变的病人则更容易被小RNA诱发出萎缩。 * 这些实验结果进一步提升了对实例研究的关注. 科学家担心,“这种小RNA注射可能直接激活TLR3,尤其对于非突变型病例负效应会更明显,也就是说我们非但不能治疗病变,反而引发了另外一些形式的异常”. * 第四节 基因治疗的靶细胞 基因治疗的靶细胞可分为两大类：体细胞和生殖细胞。将遗传物质引入人的体细胞进行基因治疗的方法为体细胞基因疗法（somatic cell gene therapy）；以生殖细胞为对象的基因治疗称为生殖细胞基因疗法（germ cell gene therapy）。 * 进行生殖细胞基因治疗能使生殖细胞中的缺陷基因得到校正，使遗传疾病不但能在当代得到治疗，而且还能将校正的基因传给下一代，最终根治遗传疾病。 * 常用的靶细胞 造血干细胞 成纤维细胞 肝细胞 肌细胞 淋巴细胞 * 1.造血干细胞 优点 ①对骨髓造血干细胞的了解、应用较多 ②骨髓造血干细胞具有分裂、分化成各种 血细胞的潜能 ③基因产物在骨髓细胞成熟后，可以通过 血液循环遍布全身 缺点 骨髓造血干细胞数量少，仅占0.1％。 * 应用举例 1.人β－珠蛋白基因转入小鼠骨髓干细胞，再 输入小鼠体内，可在骨髓、脾脏和血液检测到 人β－珠蛋白。 2.将腺苷脱氨酶（ADA)基因导入小鼠造血干细胞，在小鼠体内长时间表达。 * 2.成纤维细胞 优点：①取材容易；培养技术成熟； ②外源基因易进入，稳定表达；外 源蛋白可随血液供各种细胞使用。 例：将细胞因子基因（白细胞介素－12、 或白细胞介素－2）重组成逆转录病毒 载体转入成纤维细胞， 用于治疗肿瘤 患者。 * 第五节 基因治疗的应用 一.遗传病的基因治疗 目前限于某些单基因遗传病。将外源的野生型基因导入患者体内，表达出相应的产物，达到治疗的目的。 如： 严重联合免疫缺陷 腺苷脱氨酶 镰状细胞贫血 β