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Sirt去乙酰化酶在调节血管内皮细胞自噬反应中的角色的开题报告

一、研究背景

血管内皮细胞（VECs）是血管内壁最靠近血浆的一层细胞，能够维持血管结构完整性、调节血管张力及代谢功能，是心脑血管疾病的重要靶点。自噬是一种细胞自我调节的生命活动，能够清除细胞内的异常蛋白、脂质和细胞器，并在细胞压力时提供能量。近年来研究表明，VECs自噬能够调节血管功能并参与多种心脑血管疾病的发生发展。

Sirt去乙酰化酶是一种可以去乙酰化多种蛋白质底物的酶，调节了多种生命过程，包括代谢、衰老和炎症反应等。同时，Sirt家族成员还参与了细胞自噬调控，并且在血管内皮细胞中也存在。但是目前对于Sirt在VECs自噬调控中的作用尚不明确。

因此本研究拟探讨Sirt去乙酰化酶在调节血管内皮细胞自噬反应中的角色。

二、研究内容与方法

1.建立VECs自噬模型

首先通过孵育VECs细胞系，补充Rapamycin（自噬促进剂），建立高自噬模型。采用Westernblot和免疫荧光等方法进行验证。

2.检测Sirt去乙酰化酶在VECs自噬中的表达与变化

采用Westernblot检测VECs细胞在不同时间点下Sirt去乙酰化酶的表达变化趋势。

3.利用siRNA干扰技术分析Sirt在VECs自噬中的作用

分别用对照组、空转组和SirtsiRNA组处理VECs细胞，采用Westernblot和免疫荧光等方法检测自噬相关蛋白LC3-II的表达及光密度值，并观察VECs细胞的自噬状态。

三、研究意义

本研究的结果将有助于深入了解Sirt去乙酰化酶在调节血管内皮细胞自噬反应中的作用机制，为心脑血管疾病的发生发展提供新的治疗靶点和策略。