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Sirt1去乙酰化Nrf2对百草枯暴露小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的保护作用的开题报告

一、研究背景和意义

百草枯（Glyphosate，缩写为GLP）是一种广谱除草剂，被广泛应用于农业和园艺领域。但长期的、高剂量的GLP暴露会引起肺部损伤等健康问题。现有研究表明，GLP可以抑制Nrf2信号通路，进而导致肺部氧化应激，损害肺功能。Sirt1是一种能够去乙酰化Nrf2的酶，其在氧化应激和细胞代谢中起到重要的调节作用。因此本研究旨在探讨Sirt1去乙酰化Nrf2对百草枯暴露小鼠肺泡II型上皮细胞的保护作用。

二、研究内容和方法

1.建立小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞模型

将小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞分离培养并诱导分化，利用FITC-UEA-1及抗SP-C三联标染色验证其细胞类型和分化程度。

2.高剂量GLP诱导小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞氧化应激

将小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞培养至稳定阶段后，给予一定剂量的GLP诱导其氧化应激反应，并通过Westernblot等方式检测Nrf2信号通路的相关蛋白表达及氧化应激水平。

3.Sirt1对小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的保护作用

将Sirt1基因进一步转染至小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞中，观察其对氧化应激的保护作用，并测定相关蛋白的表达水平。

4.Sirt1去乙酰化Nrf2的作用

利用蛋白互作实验及Co-IP检测Sirt1与Nrf2之间的相互作用，并通过转染Sirt1基因或抑制Sirt1酶活力等方法探讨Sirt1去乙酰化Nrf2的作用机制。

三、研究预期结果

本研究预期结果为，Sirt1可通过去乙酰化Nrf2信号通路对GLP诱导的小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞进行保护，调节氧化应激反应的发生及程度。这一研究结果可以为进一步探究GLP对肺部相关疾病的影响及Sirt1防治氧化应激反应的原理提供新线索和研究思路。