革兰氏染色法的过程及原理.doc
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革兰氏染色法的过程及原理
一,过程
1.涂片
将培养的不同菌分别作涂片(注意涂片切不可过于浓厚),干燥、固定。固定时通过火焰l一2次即可,不可过热,以载玻片不烫手为宜。
2.染色
(1)初染加草酸铰结晶紫一滴,约一分钟,水洗。
(2)媒染滴加碘液冲去残水,并覆盖约一分钟,水洗。
(3)脱色将载玻片上面的水甩净,并衬以白背景,用95%酒精滴洗至流出酒精刚刚不出现紫色时为止,约20一30秒钟,立即用水冲净酒精。
(4)复染用番红液染1一2分钟,水洗。
(5)镜检干燥后,置油镜观察.革兰氏阴性菌呈红色,革兰氏阳性菌呈紫色。以分散开的细菌的革兰氏染色反应为准,过于密集的
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