2012第十五章甾体激素.ppt

第十五章 甾体激素类药物的分析 The analysis of Steroid Hormon Drugs 环上双键的表示方法 ?双键位置 环上取代基构型表示方法 与母核相连的基团在环平面之后的，用虚线表示…… ，称为α构型。 在环平面之前用的实线表示——，称为β构型。 合成的皮质激素 醋酸曲安奈德 结构特点： A环：脂肪环，具有?4-3-酮结构。 17位：?-醇酮基。 11位：羟基、羰基等。 9?位引入卤素 米非司酮 4.雌 激 素 可供分析的官能团： A环的酚羟基 C17 –乙炔基 第二节 理化性质和鉴别试验 性状特征 化学鉴别法 紫外分光光度法 红外分光光度法 薄层色谱法 高效液相色谱法 一、性状特征 1.性状与溶解度：白色至微黄色粉末或结晶性粉末。在水中不溶，多数溶解于甲醇、氯仿等有机溶剂。 2.熔点： 纯度、鉴定；第一法 3.比旋度 4.吸收系数 氢化可的松 鉴别 取本品约2mg ，加硫酸2ml 使溶解，放置5 分钟，显棕黄色至红色，并显绿色荧光；将此溶液倾入10ml水中，即变成黄色至橙黄色，并微带绿色荧光，同时生成少量絮状沉淀。 用途 化学鉴别 薄层色谱的显色剂 例如： “雌二醇缓释贴片”用硫酸－无水乙醇（1：1）为显色剂 醋酸泼尼松 鉴别 取本品约1mg ，加乙醇2ml 使溶解，加10％氢氧化钠溶液2 滴与氯化三苯四氮唑试液1ml ，即显红色。 反应通式 氢化可的松 鉴别 取本品约0.1mg，加甲醇1ml 溶解后，加新制的硫酸苯肼试液8ml ，在70℃加热15分钟，即显黄色。 黄体酮 鉴别 取本品约5mg ，置小试管中，加甲醇0.2ml 溶解后，加亚硝基铁氰化钠的细粉约3mg 、碳酸钠及醋酸铵各约50mg，摇匀，放置10～30分钟，应显蓝紫色。 4.活泼亚甲基反应 羰基邻位的亚甲基叫活泼亚甲基。 C3、C11、C20 C2、C12、C21 有立体障碍，不反应 C17 －羰基 可反应的活泼亚甲基：C16 活泼亚甲基反应 雌二醇【鉴别】 【鉴别】取本品约2mg，加硫酸2ml溶解，有黄绿色荧光，加三氯化铁试液2滴，呈草绿色，再加水稀释，则变为红色。 有机氟 环-氯 丙酸倍氯米松 鉴别 取本品约25mg，照氧瓶燃烧法（附录Ⅶ C）进行有机破坏，以水20 ml与0.4％氢氧化钠溶液1ml为吸收液，燃烧完全后，溶液显氯化物的鉴别反应。 丙酸氯倍他索 鉴别 取本品少许，加乙醇1ml ，混合，置水浴上加热2 分钟，加硝酸(1 →2)2ml ，摇匀，加硝酸银试液数滴，即显白色沉淀。 8. 酯的反应 C17或C21位上羟基的酯，水解产生相应的羧酸，再根据羧酸的性质进行鉴别。 如： 丙酸倍氯米松 鉴别 取本品，精密称定，加乙醇溶解并定量稀释制成每1ml中含20μg 的溶液，照分光光度法（附录Ⅳ A）测定，在239nm的波长处有最大吸收，吸收度为0.57～0.60； 在239nm与263nm波长处的吸收度比值应为2.25～2.45。 丙酸睾酮注射液的鉴别 固定相：硅胶GF254 检视方法：254nm紫外灯下检视荧光淬灭的暗斑 化学鉴别法 制备衍生物测定熔点 紫外分光光度法 红外分光光度法 薄层色谱法 高效液相色谱法 一、化学鉴别法 与强酸的呈色反应 C17 – α – 醇酮基：还原性 酮基的呈色反应 甲酮基 黄体酮＋亚硝基铁氰化钠 蓝紫色 活泼次甲基反应 雌酮＋间硝基苯 紫红色 酚羟基 乙炔基 有机氟 有机氯 酯的反应 第四节 含量测定 一、HPLC 固定相：C18（ODS） 流动相：甲醇－水 或 乙腈－水 方法：外标法；内标法，以不同的甾体激素药物为内标。 黄体酮注射液 【含量测定】 色谱条件与系统适用性试验： 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇－水(65:35 ) 为流动相；检测波长为254nm 。理论板数按黄体酮峰计算应不低于1000 ，黄体酮峰和内标物质峰的分离度应符合要求。 内标：己烯雌酚。 另用内容量移液管精密量取本品适量（约相当于黄体酮50 mg），置50 ml量瓶中，用乙醚分数次洗涤移液管内壁，洗液并入量瓶中，加乙醚稀释至刻度，摇匀；精密量取5 ml 置具塞离心管中，在温水浴内使乙醚挥散；用甲醇振摇提取4 次（第1 ～3 次各5 ml ，第4 次3 ml ），每