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RNA干扰技术抑制SHBG基因表达对原代培养滋养层细胞凋亡的影响的开题报告

概述：

性激素结合球蛋白（SHBG）是一种细胞外的蛋白质，主要存在于肝细胞和垂体中，能够调节血液中雌激素和雄激素水平的平衡。SHBG水平的异常会导致许多与性激素相关的疾病。因此，通过RNA干扰技术抑制SHBG基因表达，可能成为治疗相关疾病的一种新方式。然而，我们对其在人类原代培养滋养层细胞凋亡中的影响尚未完全了解。因此，本研究旨在探索RNA干扰技术抑制SHBG基因表达对原代培养滋养层细胞凋亡的影响。

研究内容：

本研究将通过RNA干扰技术抑制SHBG基因表达，并观察对原代培养滋养层细胞凋亡的影响。具体研究内容如下：

1.构建RNA干扰质粒：设计符合RNA干扰要求的序列，并插入到RNA干扰载体中，构建RNA干扰质粒。

2.转染细胞：将构建好的RNA干扰质粒转染到原代培养滋养层细胞中，并对转染效率进行检测。

3.采用Westernblot和Real-timePCR分析SHBG的表达水平：通过Westernblot和Real-timePCR分析转染细胞中SHBG的表达水平，并与对照组进行比较。

4.测定细胞的凋亡率：采用AnnexinV-FITC/PI双染技术检测细胞的凋亡率，并与对照组进行比较。

预期结果：

我们预计RNA干扰技术抑制SHBG基因表达，在一定程度上可以促进原代培养滋养层细胞的凋亡，但具体影响程度还需实验结果验证。

意义：

该研究结果有助于理解SHBG基因表达对原代培养滋养层细胞凋亡的影响，为相关疾病的治疗提供新思路。此外，该研究方法和思路对于研究其他基因对细胞凋亡的影响也有一定的指导作用。