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RNA干扰技术研究五氯酚PCP对MCF-7细胞类固醇激素相关基因表达的影响的开题报告

开题报告

一、选题背景

五氯酚PCP（Pentachlorophenol）是一种广泛应用于杀虫剂、防腐剂以及木材防腐剂等工业产品中的有毒物质。虽然PCP已经被禁用，但是仍然存在于一些地下水、土壤和废弃物中。五氯酚PCP对人体健康的危害性已经引起广泛关注。MCF-7细胞是一种乳腺癌细胞，这种细胞对于女性内分泌激素的敏感性很高，因此被广泛用于乳腺癌药物筛选和激素相关研究。本研究旨在通过RNA干扰技术研究PCP对MCF-7细胞类固醇激素相关基因表达的影响，从而深入了解PCP对于内分泌系统的干扰作用。

二、研究内容和方法

1.研究内容

本研究将通过RNA干扰技术研究PCP对MCF-7细胞类固醇激素相关基因表达的影响。主要研究内容包括：

（1）确定RNA干扰对目标基因表达的影响。

（2）逐一干扰类固醇激素相关基因的表达。

（3）对MCF-7细胞进行PCP处理。

（4）测定MCF-7细胞中类固醇激素相关基因的表达水平。

2.研究方法

（1）构建靶向siRNA并检验RNA干扰的有效性。

根据目标基因序列设计靶向siRNA，转染到MCF-7细胞中。使用Real-TimePCR和WesternBlot等技术检验RNA干扰效果。

（2）干扰类固醇激素相关基因的表达。

逐一干扰类固醇激素相关基因的表达，并检验干扰效果。

（3）对MCF-7细胞进行PCP处理。

将MCF-7细胞分为对照组和实验组，对实验组进行不同浓度的PCP处理。

（4）测定MCF-7细胞中类固醇激素相关基因的表达水平。

通过Real-TimePCR、WesternBlot检测MCF-7细胞中类固醇激素相关基因的表达水平。

三、预期研究成果

本研究预期可以揭示PCP对MCF-7细胞类固醇激素相关基因表达的影响。从而深入了解PCP对于内分泌系统的干扰作用。

四、研究意义

本研究具有重要的理论价值和应用价值。首先，揭示PCP对MCF-7细胞内分泌系统的干扰作用，有助于加深对内分泌干扰物质毒性机制的认识。其次，可以为人类的健康风险评价提供重要的科学依据，推进环境监测和环境保护工作。

五、研究进度安排

本研究计划用时为一年。具体进度安排如下：

第一阶段：实验方案设计和仪器设备调试。时间：1个月。

第二阶段：基因干扰试验。时间：3个月。

第三阶段：PCP处理试验。时间：3个月。

第四阶段：数据分析和结果整理、论文撰写。时间：5个月。

六、参考文献

1.FsofiT,MoslehiR,SoltanalinejadF,GholamiM.Influenceofpentachlorophenolonsteroidhormonesprofilesinthebloodplasmaofmaleadolescentstudents.Chemosphere,2017,168:924-931.

2.ZhouY,ChenH,YangJ,QuF,CuiS.PentachlorophenolexposurealterssteroidogenesisandinducesDNAdamageinhumannormalprostateepithelialcells.Chemosphere,2016,150:1-7.

3.QiX,ChenS,LiuP,etal.PentachlorophenolinducesapoptosisinNCI-H295Rcellsviamitochondrialandendoplasmicreticulumpathways.Environmentaltoxicologyandpharmacology,2016,45:293-299.