昆虫抗菌肽的合成及在毕赤酵母中的表达的任务书.docx
昆虫抗菌肽的合成及在毕赤酵母中的表达的任务书
一、任务目标:
1.根据已知昆虫抗菌肽的序列,设计合成适宜的合成方案。
2.利用化学合成方法合成昆虫抗菌肽。
3.将昆虫抗菌肽序列插入到毕赤酵母表达载体中。
4.浜学昆虫抗菌肽在毕赤酵母中的表达情况。
二、任务内容:
1.搜集昆虫抗菌肽序列信息,进行序列分析和方案设计,制定合成方案。
2.选择合适的化学合成方法,进行合成实验,监测合成过程及反应效果,保证产品的纯度和活性。
3.将合成得到的昆虫抗菌肽序列插入到毕赤酵母表达载体中,构建重组毕赤酵母的表达系统。
4.通过T7启动子诱导重组毕赤酵母的实验表达,收集发酵液,测量产物表达量及活性表现。
5.对比原始昆虫抗菌肽和表达产物的物理化学性质和生物活性,对表达系统进行优化。
三、技术路线:
1.昆虫抗菌肽的序列设计:搜集昆虫抗菌肽序列信息,进行序列分析和方案设计,制定合成方案。
2.化学合成:选择合适的化学合成方法,进行合成实验,监测合成过程及反应效果,保证产品的纯度和活性。
3.毕赤酵母的表达载体构建:利用PCR扩增毕赤酵母表达载体中所需要的元件和序列,进行连接、转化、筛选纯化。
4.重组毕赤酵母的表达:通过T7启动子诱导重组毕赤酵母的实验表达,收集发酵液,测量产物表达量及活性表现。
5.表达系统的优化:对比原始昆虫抗菌肽和表达产物的物理化学性质和生物活性,对表达系统进行优化。
四、进度安排:
1.昆虫抗菌肽的序列设计:第1周-第2周
2.化学合成:第3周-第6周
3.毕赤酵母的表达载体构建:第7周-第9周
4.重组毕赤酵母的表达:第10周-第12周
5.表达系统的优化:第13周-第15周
6.初步报告撰写:第16周
五、参考文献:
1.Li,X.,Li,Y.andSun,L.(2017).Antimicrobialpeptides:potentialcandidatesforthedevelopmentofnewanti-infectiveagents.SLASTECHNOLOGY:TranslatingLifeSciencesInnovation,22(3),305-317.
2.Liu,Z.,Chen,W.Li,Y.(2018).Developmentofanefficientexpressionsystemforthesynthesisofantimicrobialpeptidesderivedfrominsects.JournalofMolecularandCellularBiology,10(3),211-220.
3.Ryu,K.-S.,Lee,C.-H.Yeon,J.-H.(2019).Optimizationofrecombinantexpressionofinsect-derivedantimicrobialpeptidesinE.coli.JournalofMicrobiologyandBiotechnology,29(6),827-832.
4.Zhao,H.,Li,Y.andXu,H.(2020).Characterizationoftheantimicrobialactivityofinsect-derivedpeptidesandtheirpotentialapplicationinfoodpreservation.JournalofFoodSafety,40(1),e12656.