ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测技术的建立及.ppt

卵巢癌原代培养前后HE及免疫组化染色 PAN-KERATIN染色 第三十页，共六十页。 正常卵巢上皮细胞及成纤维细胞 培养结果 正常上皮细胞培养抑制效果图 成纤维细胞培养抑制效果图 第三十一页，共六十页。 培养前后细胞组成变化 培养前细胞组成 6天培养后细胞组成 淋巴 上皮 成纤维 肿瘤 淋巴 上皮 成纤维 肿瘤 细胞 细胞 细胞 细胞 细胞 细胞 细胞 细胞 40-50% 10-25% 5-10% 10-20% 1% 10% 10% 75% 选择性培养基的研究结果表明该培养基具有良好的选择性，适合肿瘤体外药敏检测的需要 第三十二页，共六十页。 质量标准 1、培养基对肿瘤细胞生长支持程度 以MCF-7细胞系作为标准细胞系，按2000个细胞/孔接种浓度接种至96孔培养板中，培养七天后，要求测定的RLU值400000。 2、ATP标准曲线 将ATP标准品配成250ng/ml，倍比(3×)稀释7次，做出ATP浓度与RLU（扣除本底吸收值）的标准曲线，要求：r0.995，最小ATP浓度（0.11ng/ml）的RLU400。 3、精密度 选MCF-7细胞系低、中、高（500、10000、40000个）数目的细胞，分别测定十组RLU值，要求： CV10% 4、敏感度 50个MCF-7细胞440RLU，同时本底值200 RLU。 第三十三页，共六十页。 第三部分 ATP-TCA体外药敏检测技术的临床应用研究 第三十四页，共六十页。 ATP-TCA 药物测试方式 第三十五页，共六十页。 评价标准 强敏感(SS)：IC5025%及IC90100%PPC 中度敏感(IS)：IC5025%及IC90100%PPC 轻度敏感(MS)：IC5025%及IC90100%PPC 耐药(R)：IC5025%及IC90100%PPC IC90:抑制90%肿瘤细胞生长的血浆峰值浓度百分比 IC50:抑制半数肿瘤细胞生长的血浆峰值浓度百分比 PPC:一定临床用药剂量对应的血浆峰值浓度 第三十六页，共六十页。 临床相关性研究病人资料 第三十七页，共六十页。 ? 表1：卵巢癌体外药敏检测与临床疗效的比较 临床相关性研究初步结果 例数 体外检测 体外检测 敏感 (SS+IS) 耐药(WS+R) 共计 体内敏感（CR+PR） 体内耐药（SD+PD） 18 2 20 1 11 12 共计 19 13 32 *34例卵巢癌中可评价标本为32例，标本可评价率为94.1% 第三十八页，共六十页。 ? 表2：卵巢癌体外药敏检测真实性评价 阳性预 测值 阴性预 测值 灵敏度 特异性 90.6% 94.7% 84.6% 90% 91.7% 整体预 测值 第三十九页，共六十页。 ATP-TCA药敏检测的临床应用 1. 设计个体化治疗方案 2. 研究新的联合化疗方案 3. 化疗药物新适应症研究 第四十页，共六十页。 一例经多重化疗复发的睾丸癌病人药敏检测结果 1. 设计个体化治疗方案 第四十一页，共六十页。 检测结果分析 药物名称 IC50（PPC%） 杀伤作用评估 BLM+DDP+VCR 12.69% 部分敏感药物 BLM+DDP+5-FU 18.59% 轻度敏感药物 BLM+CBP +VP16 14.79% 部分敏感药物 VP16+CBP 28.16% 轻度敏感药物 THP+DDP+5-FU 14.79% 部分敏感药物 VP1