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论文大孔树脂柱色谱法分离纯化茶皂素的方法研究 皖西学院毕业论文设计 大孔树脂柱色谱法分离纯化茶皂素的方法研究 作 者 指导老师 石红于 刘传芳 摘要：:通过吸附、解吸试验，筛选适合分离纯化茶皂素的大孔吸附树脂并确立纯化工艺参数。结果表明，HPD—100型大孔吸附树脂对茶皂素分离效果良好，较佳静态态吸附pH＝3.5，在规格为600mm×40mm分离柱中，装样柱高405mm、洗脱液乙醇浓度为80%、洗脱流速为10 mL/min条件下，洗脱效果最好，在此条件下所得茶皂素回收率为71.70%，纯度达到97%左右。 关键词：油茶籽皂素，提取，分离纯化，大孔吸附树脂; Macroporous resin column chromatography separation and purification method of tea saponin Abstract: : The adsorption, desorption tests, screening for isolation and purification of tea saponin and macroreticular resin purification process parameters established. The results show that, HPD-100 macroporous resin type for separation of the effect of tea saponin good, better static state adsorption pH = 3.5, in the specifications for 600mm × 40mm column, the column-like high-mounted 405mm, ethanol concentration of eluate 80%, elution flow rate of 10 mL / min under the conditions of elution best conditions in the tea saponin recovery from 71.70% for the purity of around 97% Key words: Oil camellia saponin, extraction, separation and purification, macroporous resin. 1 前言 茶皂素是一种天然表面活性剂[1]，存在于在茶叶、茶籽、和油茶籽中，尤以油茶籽中含量最大。纯茶皂素是白色微细柱状结晶体，分子式为C57H90O26，分子量1203，熔点223-224℃，pH=6.2。分子结构式如下[2]： 图1 茶皂素分子结构图 皖西学院毕业论文设计 茶皂素对甲基红显酸性，难溶于冷水、无水甲醇、无水乙醇，易溶于热水、含水甲醇、 含水乙醇、正丁醇及冰醋酸、酸酐和吡啶，不溶于乙醚、丙酮、苯、石油醚等有机溶剂[3]。 茶皂素由于其优越的表面活性和药用价值，其应用越来越广泛。过去，人们对茶皂素的提取和纯化已作了大量的研究[4-6]，但至目前，高纯度的茶皂素仍然很难得到，这制约了茶皂素在医药方面的应用。所以，当前人们高度关注高纯度茶皂素的生产工艺研究。 大孔树脂是一种不溶于酸、碱及各种有机溶剂的有机高分子聚合物，大孔树脂分离技术是20世纪60年代末发展起来的继离子交换树脂后的分离新技术之一。大孔树脂的孔径与比表面积都比较大，在树脂内部具有三维空间立体孔结构,由于具有物理化学稳定性高、比表面积大、吸附容量大、选择性好、吸附速度快、解吸条件温和、再生处理方便、使用周期长、宜于构成闭路循环、节省费用等诸多优点，近年来大孔树脂在黄酮、皂甙等天然活性物质的分离纯化研究方面应用越来越广泛[6,7]。本文拟通过大孔树脂对茶皂素粗产品的吸附—解吸实验研究，探讨大孔树脂对油茶籽提取物中粗茶皂素物质的纯化效果，分析大孔树脂类型、pH值、及洗脱剂浓度等因素对纯化茶皂素的影响，建立合理的大孔树脂柱色谱法分离纯化茶皂素的的工艺过程。 2 实验部分 2.1 材料和实验仪器 电子天平（型号 FA1104N，上海精密科学仪器制造厂）；旋转蒸发器（型号RE—52A，上海振捷实验设备有限公司）；集热式磁力加热搅拌器（型号DF—II，江苏省金坛市医疗仪器厂）；真空干燥箱（型号DZX—6090，上海福玛实验设备有限公司）；循环水式多用真空泵（型号SHZ—C,河南巩义市英峪予华仪器厂）；电炉（天津市泰斯特仪器有限公司）；分液漏斗（500