一株产CGTase环糊精葡萄糖基转移酶的细菌改性.pdf

第４０卷第 １期 南京师大学报(自然科学版) Ｖｏｌ４０ Ｎｏ１ ２０１７年３月 ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＮＡＮＪＩＮＧ ＮＯＲＭＡＬ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ(Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｅｄｉｔｉｏｎ) Ｍａｒꎬ２０１７ － ｄｏｉ:１０.３９６９/ ｊ.ｉｓｓｎ.１００１ ４６１６.２０１７.０１.０１４ 一株产 ＣＧＴａｓｅ环糊精葡萄糖基转移酶的 细菌改性甜菊苷的研究 １ １ ２ １ １ꎬ２ 宋婷婷 ꎬ尹慧慧 ꎬ杨　 帆 ꎬ闫　 莽 ꎬ陈育如 (１.南京师范大学生命科学学院ꎬ江苏省微生物资源产业化工程技术研究中心ꎬ江苏省功能微生物与基因组学重点实验室ꎬ 江苏省生物多样性与生物技术重点实验室ꎬ江苏 南京 ２１００２３) (２.格里菲斯大学环境学院和环境未来研究所ꎬ澳大利亚 昆士兰 ＱＬＤ４２２２) [摘要]　 本文对筛选的一株产ＣＧＴａｓｅ环糊精葡萄糖基转移酶的细菌(Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ. ＣＧＴ７)转化并改性甜菊苷进行 了研究ꎬ探讨了影响酶活性和转化效果的因素. 实验结果表明ꎬ在ＣＧＴ７菌的培养过程中ꎬ碳源、氮源、温度和初始 ｐＨ等因素对菌株产酶活性均有不同程度的影响ꎬ适宜的碳源为马铃薯淀粉ꎬ氮源为豆粕粉ꎬ培养温度为３０ ℃ꎬ初 始ｐＨ值为８.５.适宜条件下培养的ＣＧＴ７菌的酶活性可达５４４ Ｕ/ ｍＬꎬ以甜菊糖苷为底物、环糊精为糖基供体时ꎬ转 糖苷产物Ｓｔｖ￣Ｇｌｕ浓度为０.６１ｍｇ/ ｍＬ. [关键词]　 环糊精葡萄糖基转移酶ꎬ甜菊糖ꎬ酶法改性ꎬ糖基供体ꎬ酶活性 － － － [中图分类号]Ｑ８１４　 [文献标志码]Ａ　 [文章编号]１００１ ４６１６(２０１７)０１ ００９５ ０４ Ｂｉｏｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ ｏｆ Ｓｔｅｖｉｏｓｉｄｅ ｂｙ ＣＧＴ７ Ｂａｃｔｅｒｉａ ｗｉｔｈ Ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ Ｇｌｕｃａｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ Ａｃｔｉｖｉｔｙ １ １ ２ １ １ꎬ２ Ｓｏｎｇ Ｔｉｎｇｔｉｎｇ ꎬＹｉｎ Ｈｕｉｈｕｉ ꎬＹａｎｇ Ｆａｎ ꎬＹａｎ Ｍａｎｇ ꎬＣｈｅｎＹｕｒｕ (１.Ｊｉａｎｇｓｕ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｒｅｆｏｒ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ＲｅｓｏｕｒｃｅꎬＪｉａｎｇｓｕ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｆｏｒ Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｍｉｃｒｏｂｅｓ ａｎｄ Ｇｅｎｏｍｉｃꎬ Ｊｉａｎｇｓｕ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｆｏｒ Ｂｉｏｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ａｎｄ ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙꎬＳｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｌｉｆｅ ＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＮａｎｊｉｎｇ Ｎｏｒｍａｌ ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＮａｎｊｉｎｇ２１００２３ꎬＣｈｉｎａ) (２.Ｇｒｉｆｆｉｔｈ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｆｕｔｕｒｅｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ＩｎｓｔｉｔｕｔｅꎬＧｒｉｆｆｉｔｈ ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＱｕｅｅｎｓｌａｎｄ４２２２ꎬＡｕｓｔｒａｌｉａ) Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｔｈｉｓｗｏｒｋ ｓｃｒｅｅｎｅｄｔｈｅｓｔｒａｉｎＣＧＴ７ｗｈｉｃｈｐｒｏｄｕｃｅｓｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎｇｌｕｃａｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅꎬａｎｄｓｔｕｄ