利用pSOS系统筛选靶向HBV病毒X基因的siRNA.pdf
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生物技术通报
BloTECHNOLOGY
·研究报告· BULLETlN 2010年第11期
韦德芳1 高健1 曾春华2 彭明利2 任红2
(1重庆医科大学附属第二医院消化科，重庆400010：
(2重庆医科大学病毒性肝炎研究所感染性疾病分子生物学教育部重点实验室，重庆400010)
摘 要：
X-siRNA；pSOS—X·siRNA经Pac
time
PCR检测胞内HBs
HepG2．2．15细胞上清HBsAg、HBeAg表达，Westernblotting检测胞内蛋白HBsAg、HBcAg表达，Real
mRNA、HBxmRNA的转录。转染4
效果最强。siRNA4使HepG2．2．15细胞转染后4
HBeAg为(21．69
mRNA和HBx 10±
0．028，均为各处理组中最低(P0．01)，HBs
X基
因的siRNA靶点。
关键词：pSOS乙肝病毒x基因 RNA干扰
SelectionandValidationof siRNA Sitesfor
OptimalTarget
BVirusXGenemRNA Vector
Hepatitis bypSOS System
Wei GaoJianl Chunhua2 Ren
Defan91 Zeng PengMingli2 Hon92
Second
(1DepartmentofGastroenterology，theAffiliatedHospital，Chongqing400010；2KeyLaboratoryofMolecularBiologyofInfectious
Viral 400010)
Disease，InstituteforHepatitis，ChongqingUniversityofMedicalSciences，Chongqing
was for
toconstructthe vector and B
Abstract：Thestudy eukaryotieexpressionpSOS-X·-siRNApSOS··siRNAtargetingHepatitis
and intothe carcinomacelllines and
virus(HBV)Xgene．AftertransfectingpSOS·X·siRNApSOS-siRNAhepatocellular HepG2
HBx
canscreenandvalidatethe short RNAs．To and the
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