不同药用部位及不同采收期疏花荠苎总黄酮含量的动态研究.doc

摘要：目的 研究不同药用部位及不同采收期疏花荠苧总黄酮的含量变化，为确定疏花荠苧药材药用部位及最佳采收期提供依据。 方法 采用分光光度法测定总黄酮含量。 结果 不同采收期疏花荠苧药材总黄酮含量以9月份为高；不同药用部位，叶中总黄酮含量明显高于茎、根。 结论 建议疏花荠苧药材采收以9月地上部分为宜。 关键词：疏花荠苧；总黄酮；含量测定 疏花荠苧Mosla dianthera)为唇形科一年生草植物，分布，具有清暑热、祛风湿、消肿、解毒之功效用于治感冒、中暑、疟疾、便秘和慢性支气管炎等[1][2-5]。本文采用分光光度法，比较不同药用部位及不同采收期疏花荠苧总黄酮的含量，以期为合理开发利用该植物资源提供科学依据。 1 仪器与试药 S22PC可见分光光度计（上海棱光技术有限公司），Mettler Toledo AG135电子天平。疏花荠苧采自浙江浦江，经鉴定为疏花荠苧Mosla dianthera，阴干备用。芦丁标准品购自中国药品生物制品检定所（批号：100080-20030），所用试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 供试品溶液的制备[6] 取疏花荠苧药材粉末，索氏回流石油醚脱脂，加20倍量65%乙醇，80℃水浴回流提取2次，每次1ｈ，过滤，合并滤液，回收乙醇至无乙醇味，用50%乙醇定容至25mL，摇匀，即为供试品溶液。 2.2 标准品溶液的制备 精确称取干燥至恒重的芦丁标准品6.5mg，置25mL量瓶，加50%乙醇使溶解，并稀释至刻度，摇匀，即为标准品溶液。 2.3 测定波长的选择 分别取芦丁标准品溶液和供试品溶液0.2mL，置25mL量瓶，加5%NaNO2试液1.0ｍL，放置6min，加10%Al(NO3)3试液1.0ｍL，放置6min，加10%NaOH试液10ｍL，加50%乙醇至刻度,摇匀，放置15min，以相应试剂作空白，于可见分光光度计上，在波长400～600nm之间进行扫描，实验结果表明芦丁标准品溶液和供试品溶液均在504nm处有最大吸收，故选504nm为测定波长。 2.4 标准曲线的制作 精密吸取芦丁标准品液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0mL，置25mL容量，按“2.1.3”项下操作，以相应试剂作空白，于504nm处测定吸光度。以浓度（C）对吸光度（A）绘制工作曲线得回归方程：C=3.0469A－0.008（r=0.9997），结果表明，芦丁浓度在0.13～1.04mg/mL范围内呈良好的线性关系。 2.5 精密度试验 精密吸取同一对照品溶液，平行测定5次，结果RSD为0.%，表明精密度良好。 2.6 重复性试验 精密吸取同一批疏花荠苧样品5份，按供试品溶液的制备方法操作，按“2.3”项下条件测定，结果RSD为1.6%，表明重复性良好。 2.7 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别于显色完全后0，5，15，30，45，60ｍin于504nm测定吸光度，结果RSD为0.9%，表明供试品溶液显色完全后在1h内稳定。 2.8 加样回收试验 精密称取已知含量的疏花荠苧样品，平行5份，加入适量对照品溶液，按“2.1”项操作，计算回收率，结果见表1。 表1 加样回收试验结果 样品量/mg 加入量/mg 测定量/mg 回收率/% 平均回收率/% RSD/% 2.062 1.950 4.015 100.2 1.971 1.950 3.891 98.46 2.108 1.950 4.011 97.59 99.02 1.98 2.017 1.950 4.003 101.8 2.169 1.950 4.061 97.03 2.9 样品测定 取疏花荠苧干燥药材，按叶、茎、根3个同部位制备供试品溶液，按“2.3”项测定操作，计算含量，结果见表2。 表2 不同药用部位及采收期总黄酮含量 不同采收期 不同部位 总黄酮含量·g-1 5月 6月 7月 8月 9月 10月 11月 根 茎 叶 3 讨论 各月份不同部位中总黄酮含量叶。其中以9月份疏花荠苧中总黄酮含量最高。色绿柔软 近年研究发现，黄酮类具有较强的抗自由基作用，A环上5,7-二羟基是其活性必需基团，且消除游离基活性大小与B环上羟基取代数目有关，数目越多活性越强[7]。现代研究表明，石香薷、苏州荠苧含有多种5,7-二羟基黄酮及其衍生物[8]，与疏花荠苧为同属植物。因此，根据植物亲缘性理论，疏花荠苧可能亦含有多羟基黄酮，可作为一种天然抗氧化剂，具有潜在参考文献：中国科学院中国植物志编辑委员会主编.中国植物志[M].北京：科学出版社出版, 1997,66:287-293.Lee DH, Kim SH, Eun JS, et al. Mosla dianthera inhibits mast cell-mediated