IPTG诱导浓度_时间及温度对重组促性腺激素释放激素基因表达的影响.pdf

2006 8 17 IPTG 1, 2 3 4 5 2 2 金元昌 , 刘 利 , 苏晓艳 , 李景鹏, 李会东, 周建红 ( 1. , 530004; 2. , 411201; 3. , 542800; 4. , 411201; 5. , 150030) : Q786 : A : 1004 7034 ( 2006) 08 0017 03 : 促性腺激素释放激素; 诱导浓度; 外源蛋白; 达 : 以人工合成的促性腺激素释放激素( gonadotrop n re leas ng hormone, GnRH ) /转运肽( TRS )基 因与 达载体 pGEX - 6p - 1相连的重组子( pGE - G )作为研究对象, 转化大肠杆菌BL2 1( ED3) plyS 利用 IPTG作为诱导剂, 分析比较不同 IPTG 诱导条件对于 达产物的影响, 以确定最佳 IPTG 诱导条 件结果 明: 融合蛋白大部分以包涵体的形式存在, 诱导温度为 30 e ; IPTG 浓度为 012 mmo l/L 时, 可溶性融合蛋白 GST - GnRH /TR S 达量最大光密度扫描对 达产物进行初步定量, 明 达产物约占菌体总蛋白的 3313% IPTG B- D - , B- ; , , , IPTG , 1. 3 , , ( , B eckm an ), O , ( , M ett ler To ledo) , ( , G lson, , ( GnRH ) , Eppendorf) , - 20 e ( ) , - 70 e ( , GnRH , Sanyo) , ( , B o - Rad) , ( , , , Sanyo), ( , UV P ) , ( [ 1] GnRH , M ll pore), ( DYY - , IPTG ), ( F rom a Sc ent f c 18291 SN 1 17069 GnRH , IPTG - 15) , ( , UV - 120 - 02) , pH GnRH ( pH S - 3C , ), 1 ( DK - 80 , ) , 1. 1 (TGL - 16, ), pGEX - 6p - 1, ( LD4 - 2 , ) , ; JM 109 BL 21( DE3) p lyS, ( H ZS- D , ) , PROM EQA ; / ( DYY - , ) pGE - G, 1. 4 pGE - G BL21( DE3) p lysS 1. 2