实验检测组织中的还原性糖、脂肪及蛋白质.ppt
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主讲人:张晓燕 实验选材: 颜色浅,含糖多。 例如:苹果或梨的匀浆。但西瓜汁、草莓汁、葡萄汁等不行。 1、还原糖的鉴定 实验原理: 还原糖:葡萄糖、果糖、麦芽糖等 斐林试剂本身不稳定,需要现用现配。 甲液:质量浓度为0.1g/mlNaOH溶液 乙液:质量浓度为0.05g/mlCuSO4 甲液与乙液等量混合摇匀使用,有效成分是Cu(OH)2 ,在水浴加热50-65°C约2分钟后,会生成砖红色的Cu2O沉淀。 颜色变化:浅蓝色——棕色——砖红色 还原糖的鉴定步骤: 注入组织样液2ml 过滤:将玻璃漏斗插入试管中,漏斗上垫一层纱布 加斐林试剂:2ml(由斐林试剂甲液和乙液充分混合而成,不能分别加入) *斐林试剂:甲液0.1g/mlNaOH溶液 乙液0.05g/mlCuSO4 (等量混合摇匀使用) 水浴加热: 50-65°C 2min 观察溶液颜色变化: 记录实验现象 2、脂肪的鉴定 实验选材:富含脂肪的植物组织,如花生、芝麻、核桃仁等。 实验原理: 脂肪+苏丹III--染成橘黄色 脂肪+苏丹IV---染成红色 50%的酒精可以洗去细胞外的染色剂,便于在显微镜下清晰地观察到花生组织细胞内被染色的脂肪。 脂肪的鉴定步骤:方法一 向待测样品液中滴加3滴苏丹三染液,观察样液被染色的情况。 脂肪的鉴定步骤:方法二 取材:花生种子(浸泡3-4h),将子叶削成薄片 ,取理想薄片,在薄片上滴2-3滴苏丹Ⅲ染液(染色的时间一般为2-3min左右), 酒精洗去浮色,制成临时装片。 *脂肪+苏丹III--染成橘黄色 脂肪+苏丹IV---染成红色 观察:先在低倍镜下,找到材料的脂肪滴,然后,转为高倍镜观察 3、蛋白质的鉴定 实验选材: 含蛋白质多,如豆浆、鸡蛋清(稀释)、鲜肝研磨液等。 实验原理: 蛋白质+双缩脲试剂--紫色反应 双缩脲试剂:A液0.1g/mlNaOH溶液 B液0.01g/mlCuSO4溶液 (与斐林试剂有何不同?) 蛋白质的鉴定步骤: 选材:牛奶、豆浆 等 染色:先加A液2ml摇匀,提供碱性环境; 再加B液4-5滴,摇匀。(不能过量,否则会生成大量蓝色的Cu(OH)2 ,干扰紫色的观察。 4、淀粉的鉴定 实验选材: 富含淀粉的植物,如小麦、玉米等。 实验原理: 碘遇淀粉会变蓝。 实验步骤: 向试管内注入2ML的待测组织样液; 向试管内滴加2滴碘液,观察颜色变化。 实验记录 成分 待测样液 还原糖 脂肪 蛋白质 1 2 3 4 有4种样品液,目测哪一种为苹果汁? 如何对四种样品液分别进行还原性糖、蛋白质、脂肪的检测? 花生子叶临时切片如何制作? 小知识 牛奶中的主要成分是:脂肪、蛋白质、乳糖、无机盐类及维生素等各种成分.正常牛奶的成分大致是稳定的,成分含量在一定范围内变动,其中脂肪变动量大,蛋白质次之,乳糖的含量则很少有变化. 豆浆主要成分:每百克豆浆含蛋白质4.5克、脂肪1.8克、碳水化合物1.5克、磷4.5克、铁2.5克、钙2.5克以及维生素、核黄素等,对增强体质大有好处。 苹果的主要成分:1个苹果中含有类黄酮约30毫克以上,苹果中含有15%的碳水化合物及果胶,维生素A、C、E及钾和抗氧化剂等含量也很丰富。 1个苹果(154g)膳食纤维5g,钾170mg,钙10mg,碳水化合物22g,磷10mg,Vc7.8g,Vb7.8g。
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