免疫印迹仪及控制方法.pdf

一免疫印迹法.doc 一。免疫印迹法 免疫印迹法（immunoblotting test，IBT）亦称酶联免疫电转移印斑法（enzyme linked immunoelectrotransfer blot，EITB），因与Southen早先建立的检测核酸的印迹方法Southen blot相类似，亦被称为Western blot。免疫印迹（western blotting）是在蛋白质电泳分离和抗原抗体检测的基础上发展起来一项检测蛋白质的技术。它将SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的高分辨力与抗原抗体反应的特异性相结合。典型的印迹实验包括三个步骤①蛋白质的电泳分离；②将电泳后凝胶上的蛋白质转移至固体膜上，用非特异性，非反

2017-11-21 约1.85万字 19页立即下载

免疫印迹法的实验技术.ppt 根据待测样品的蛋白质分子量选择转移的电流大小及时间.我们通常200mA/膜，按照目的蛋白分子大小、胶浓度选择转移时间，具体可以根据实际适当调整。目的蛋白分子大小(kDa)胶浓度转移时间(h)801408%1.5-2.0258010%1.515—4012%0.752015%0.5NC膜预处理：（剪裁与胶大小一致的NC膜，将其浸入1×转移缓冲液平衡5分钟以上。注意：必须保证NC膜始终完全浸于转移缓冲液中，裁剪时要戴手套，避免手上蛋白将膜污染。）剪裁6层滤纸，比胶略大，用转移缓冲液浸泡后待用，同时4层海绵垫也用转移液浸泡。取胶：撬开玻璃板，将多余的胶切除，把裁好的胶放人转移液中。12345制作“三明

2025-01-03 约5.4千字 10页立即下载

实验三免疫印迹.doc Western blotting检测大肠杆菌重组蛋白 1. 背景印迹法（blotting）是指将样品转移到固相载体上，而后利用相应的探测反应来检测样品的一种方法。 1975年，Southern建立了将DNA转移到硝酸纤维素膜（NC膜）上，并利用DNA-RNA杂交检测特定的DNA片段的方法，称为Southern blotting。之后，James Alwine、David Kemp和George Stark三位教授又发明了RNA杂交检测技术，因与Southern blotting相似，故命名为Northern blotting。George Stark这位教授在两年后又开发出类似的蛋白质检

2017-02-05 约7.52千字 7页立即下载

实验四免疫印迹分析.ppt 实验十 免疫印迹（Western bloting) 组成十二烷基磺酸纳-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS）蛋白质转印固相免疫测定蛋白质的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳过程中三种物理效应： ①样品的浓缩效应 ②凝胶的分子筛效应 ③一般电泳分离的电荷效应电泳分离的电荷效应 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳中，由于SDS和巯基乙醇作用，使得蛋白质分子中二硫键还原，氢键、疏水键打开，SDS按1．4gSDS／lg蛋白质的比例结合到蛋白质多肽链分子上，形成SDS—多肽复合物。十二烷苯磺酸根带负电，使各种SDS—多肽复合物都带有相同密度的负电荷，它的量大大超过了蛋白质多肽分子原有的电荷量

2016-03-21 约1.59千字 15页立即下载

免疫印迹-讲解.ppt 操作步骤 lSDS待胶凝固后开始点样(上样量5ul)，70V积层胶；170V分离胶 l 转膜 1.PVDF膜的准备处理；大小应与凝胶吻合，不要大于凝胶。依次将PVDF膜放在甲醇中10秒，去离子水中5分钟，电转移液10分钟。 2.纤维垫的准备；应将纤维垫放在电转移液中使其完全浸透。 3.滤纸的准备；将与凝胶大小的滤纸泡入电转移液中10分钟。操作步骤 4.安装：打开转移盒后分别将（1）纤维垫铺在黑色多孔板上（2）将与凝胶大小的滤纸轻轻放在纤维垫上（3）小心将凝胶放置在滤纸上，用玻璃棒赶跑气泡（4）将PVDF膜放置在凝胶上，用玻璃棒赶跑气泡（5）将滤纸轻铺于PVDF膜上，用玻璃棒赶跑气

2016-10-31 约字 40页立即下载

免疫印迹杂交.docx 免疫印迹杂交（Western blot）（050302A） 1．仪器（1）制胶模具（2）跑胶及转膜装置（3）大小玻板（4）电泳电源（5）电磁炉 2．试剂：（1）Tris base、（2）SDS （3）BSA（购自Biotech）（4）Bis-acrylamide（亚甲双丙烯酰胺）（5）Acrylamide（丙烯酰胺）（6）Glycine （7）DTT （8）NaCl（购自BBI）（9）APS（购自Amresco）（10）Tween-20（温州清明化工厂） 3．溶液配制：（1）4 × sample Buffer 终浓度Stock液10 ml 工作液0.25 M

2017-04-25 约6.44千字 7页立即下载

免疫印迹法的实验技术.ppt 实验步骤NC膜预处理：（剪裁与胶大小一致的NC膜，将其浸入1×转移缓冲液平衡5分钟以上。注意：必须保证NC膜始终完全浸于转移缓冲液中，裁剪时要戴手套，避免手上蛋白将膜污染。）剪裁6层滤纸，比胶略大，用转移缓冲液浸泡后待用，同时4层海绵垫也用转移液浸泡。取胶：撬开玻璃板，将多余的胶切除，把裁好的胶放人转移液中。转膜①制作“三明治”：由夹子的黑板（阴极）侧开始，依次为黑板→海绵垫片→3层滤纸→胶→NC膜→三层滤纸（注意：排除气泡）→海绵垫片(阳极)，扣紧转膜夹板，放入含有转膜缓冲液的转移电泳槽中（见蛋白质转移示意图）。第30页，共46页，星期日，2025年，2月5日第31页，共46页，星期日，20

2025-06-06 约6.11千字 46页立即下载

蛋白免疫印迹法原理及步骤.ppt 关于蛋白免疫印迹法原理及步骤第1页，讲稿共9页，2023年5月2日，星期三WesternBlot的原理WesternBlot：首先利用SDS对蛋白质样品进行分离，然后转移到固相载体（例如NC膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。转移后的NC膜就称为一个印迹（blot）,用于对蛋白质的进一步检测。印迹首先用蛋白溶液（如5%的BSA或脱脂奶粉溶液）处理以封闭NC膜上剩余的疏水结合位点，而后用所要研究的蛋白质的抗体（一抗）处理，印迹中只有待研究的蛋白质与一抗特异结合形成抗原抗体复合物，而其它的蛋白质不能与一抗结合，这样清洗除去未结合的一抗后，印迹中只

2024-01-02 约1.88千字 9页立即下载

免疫印迹技术详细详解.doc Western Blot 原理和操作方法（详细） $5V??工作原理?Y|-_2IU?? 蛋白质的电泳分离是重要的生物化学分离纯化技术之一,电泳是指带电粒子在电场作用下,向着与其电荷相反的电极移动的现象.根据所采用的支持物不同,有琼脂糖凝胶电泳,淀粉凝胶电泳,聚丙烯酰胺凝胶电泳等.其中,聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)由于无电渗作用,样品用量少(1-100μg),分辨率高,可检出10-9-10-12mol的样品,凝胶机械强度大,重复性好以及可以通过调节单体浓度或单体与交联剂的比例而得到孔径不同的凝胶等优点而受到广泛的应用.?-O{`?Q%9v??SDS是最常用的定性分析蛋白质的电泳方式

2016-08-11 约1.46万字 11页立即下载

一种全自动免疫印迹仪.pdf (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 112834765 A (43)申请公布日 2021.05.25 (21)申请号 202011636587.7 (22)申请日 2020.12.31 (71)申请人赛乐进（绍兴）科技有限公司

2023-06-02 约1.13万字 11页立即下载

一种马泰勒氏虫病免疫印迹检测方法及试剂盒制备[发明专利].docx 研究报告 PAGE 1- 一种马泰勒氏虫病免疫印迹检测方法及试剂盒制备[发明专利] 一、背景技术 1.马泰勒氏虫病概述 (1)马泰勒氏虫病是一种由马泰勒氏虫引起的寄生虫病，这种寄生虫主要感染家畜，特别是马。马泰勒氏虫病在全球范围内均有分布，尤其在热带和亚热带地区流行较为严重。该病主要通过蜱虫作为传播媒介，蜱虫叮咬感染了马泰勒氏虫的马，然后在吸血过程中将病原体传播给其他马匹。 (2)马泰勒氏虫病的临床表现多样，包括发热、贫血、消瘦、食欲不振等症状，严重时可导致马匹死亡。此外，该病还会引起其他并发症，如心脏炎、心肌炎等，给养殖户带来巨大的经济损失。目前，针对马泰勒氏虫病的治疗方法有限，主要依赖于抗

2025-02-23 约1.19万字 23页立即下载

一种马泰勒氏虫病免疫印迹检测方法及试剂盒制备[发明专利].pptx 一种马泰勒氏虫病免疫印迹检测方法及试剂盒制备[发明专利];目录;01;马泰勒氏虫病的概述;马泰勒氏虫病对马匹的影响;现有检测方法的局限性;02;免疫印迹检测技术概述;马泰勒氏虫病抗原与抗体反应原理;免疫印迹检测步骤;03;抗原制备;抗体制备;试剂与耗材;04;抗原包被;抗体标记;试剂盒组装;05;特异性与灵敏度评估;稳定性与重复性评估;与其他检测方法的比较;06;市场现状;潜在市场分析;应用前景;07;研究总结;未来研究方向;创新点与突破;THANKS

2025-03-30 约小于1千字 31页立即下载

一种智能退热仪及降温方法.pdf (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 113384392 A (43)申请公布日 2021.09.14 (21)申请号 202110552520.3 (22)申请日 2021.05.20 (71)申请人曾华伦地址 51

2023-06-17 约9.85千字 10页立即下载

Western-blotting蛋白免疫印迹实验.pptx 蛋白免疫印迹 （Western Blot）; WB的基础;目录;1.1 蛋白免疫印迹的概念;1.2 蛋白免疫印迹的应用;1.2 蛋白免疫印迹的应用;1.3 WB的原理;1.4 WB的特点;目录;2.1 试剂;丙烯酰胺 ;RIPA裂解液;2.1 试剂配置;2.1 试剂配置;2.1 试剂配置;2.2 耗材;2.3 设备;2.3 设备;2.3 设备;目录;3.1 实验步骤;3.1.1 蛋白样品制备;a).配制BCA工作液：根据标准品和样品数量，按50体积试剂A,1体积试剂B配制适量BCA工作液，充分混匀。 b).将标准品、待测样品和工作液按下表加入到96孔板中，混匀。

2018-10-22 约小于1千字 59页立即下载

免疫印迹技术详细资料.doc Western Blot 原理和操作方法（详细） $5V??工作原理?Y|-_2IU?? 蛋白质的电泳分离是重要的生物化学分离纯化技术之一,电泳是指带电粒子在电场作用下,向着与其电荷相反的电极移动的现象.根据所采用的支持物不同,有琼脂糖凝胶电泳,淀粉凝胶电泳,聚丙烯酰胺凝胶电泳等.其中,聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)由于无电渗作用,样品用量少(1-100μg),分辨率高,可检出10-9-10-12mol的样品,凝胶机械强度大,重复性好以及可以通过调节单体浓度或单体与交联剂的比例而得到孔径不同的凝胶等优点而受到广泛的应用.?-O{`?Q%9v??SDS是最常用的定性分析蛋白质的电泳方式

2016-03-23 约1.46万字 14页立即下载