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RNAi抑制NEK293细胞TGFβ1表达的研究.pdf

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维普资讯 MilMe 0 dUniv)208,29(12) http://journal,fmmu.edu.cn 四军医大学学报 (JFourI—h — — — · 研究原著 · 文章编号:1000-2790(2008)12_1125-03 RNAi抑制 NEK293细胞 TGF- 表达的研究 崔飞伦 ,邱 镇 ,陆洪兵 ,姚 震 ,林大春 (江苏大学附属人民医院泌尿外科,江苏 镇放军第359医院泌尿外科,江苏镇江 212000) Inhibitory effectofsiRNA on expres- 作用 (P0.05),实验组细胞生长受到抑制、凋亡增加 (PO.05).结论:应用RNAi技术可明显抑制 TGF—p 的表 sion oftransforming growth factor- 达,并高效的抑制NEK293的生长、诱导其凋亡. inNEK293cells 【关键词】转化生长因子p;肾纤维化;RNA干扰 CU/Fei—Lun ,QIUZhen,LUHong—Bing,YAOZhen ,LIN 【中图号】R692 【文献标识码】A Do—Ch“n DepartmentofUrology,Affiliated People’sHospital,Jiangsu O 引言 University,Zhe@ang212002,China,。DepartmentofUroloyg, 肾纤维化是肾脏多种损伤,如创伤、缺血、肾移植 359thHospitalofPLA,Zhe~iang212000,China 术后慢性排异反应及尿路梗阻等修复的共 同转归. 长期以来,肾纤维化被描述为不可逆的静止性瘢痕组 A【bstract】AIM:Toexploretheeffectsoftransforminggrowth 织,但近年来的研究认为纤维化实际上是一个动态过 factor(TGF)一p1一specificsiRNAsonTGF—plexpression,cellcir— cleandapoptosisofNEK293cells.METHODS:ThreeTGF—p】一 程 ,其特征为细胞外基质(ECM)迅速重建和长期的 specificsiRNAswereselectedwiththesuppressingeffect.RNAi 成纤维细胞激活_1],已知的主要效应细胞为成纤维 expressionvectorswereconstructed andtransfectedintoNEK293 细胞、肾间质细胞等.体外研究-z表明,转化生长因 cells.RT—PCR andW esternBlotwereusedtodetecttheexpres— 子.13。(TGF一31.)是肾间质细胞的主要调控因子.本研 sionofTGF—p1.Theproliferationofthecellswasmeasuredby 究应用 TGF一31.特异性小干扰 RNA(siRNA),以质粒 MTFtest.Th eapoptosisofNEH293cellswasmeasured byflow 载体转染大鼠肾间质细胞NEK293,观察特异性 siR— cytometry.A nonsensesmallRNA wassetasnegative contro1.
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